32 J. Keutner, Über das Vorkommen und die Verbreitung stickstoffbindender Bakterien im Meere. 6 
Was die Qualität des Bodens angeht, so ergaben die Untersuchungen Beijerincks, daß Azofobacter 
in zahlreichen verschiedenen Bodenarten nachgewiesen werden konnte. Auch machte er die Beobachtung, 
daß er in Dünen des Seestrandes vorhanden war, hingegen fehlte er in Heideböden, was auf die in denselben 
vorhandene, für die Entwicklung von Azofobacter schädliche Säure zurückzuführen sein dürfte. 
Aus dem Gesagten ergibt sich, daß überall auf dem Festlande, wo man gesucht hat, jene Bakterien 
hausen und so im Verein mit anderen Faktoren dafür sorgen, daß dauernd das Gleichgewicht zwischen 
freiem und gebundenem Stickstoff gewährleistet wird. Ist es doch auch bekannt, daß die Land- und 
Forstwirtschaft!), ferner der Weinbau!) heutigen Tages sich bemühen, die Fähigkeit jener Bakterien durch 
geeignete Maßnahmen in ihren Dienst zu stellen. 
So erinnere ich nur an den bekannten Versuch von Kühn), welcher 20 Jahre hindurch Roggen 
auf ein und demselben Acker ohne Stickstoffdüngung kultivierte und dabei normale Ernten erzielte, was 
ohne Zweifel nur durch Anwesenheit stickstoffbindender Bakterien im Boden möglich war. Es braucht 
daher nicht weiter betont zu werden, daß es nicht ohne Interesse war, die Frage nach dem Vorkommen 
stickstoffbindender Bakterien im Meere in Angriff zu nehmen. 
Nachdem es gelungen war°), nach verschiedenen Versuchen das Vorkommen der beiden oben 
genannten Bakterien im Meere nachzuweisen, konnte man nach zwei Richtungen die Frage weiterhin zu 
fördern suchen: entweder die in bekannten Meeresgegenden gefundenen Formen in ernährungsphysiologischer 
Hinsicht genau studieren oder aber zunächst einmal, ohne einzugehen auf physiologische Details, die 
Frage mehr nach der biologisch-geographischen Seite hin fördern, die natürlichen Standorte tunlichst 
ermitteln, und durch die Untersuchung von Wasser, Algen, Grundproben aus verschiedenen Gegenden und 
Tiefen ein Bild zu schaffen von der geographischen Verbreitung jener Organismen. 
Ich habe hauptsächlich nach der zweiten Richtung hin gearbeitet und lege in Folgendem meine 
bisherigen Ergebnisse vor). 
Analytische Methode. 
Zur Kultur benutzte ich Winogradsky’s „elektive“ Kulturmethode; als Nährsalze dienten Dikalium- 
phosphat, Magnesiumsuliat, als Kohlenstoffquelle meistens Mannit oder Dextrose, als Lösungsmittel reines, 
filtriertes Ostseewasser unter eventueller Zugabe bestimmter Mengen Kochsalz; ferner Leitungswasser, je 
nachdem das Impfmaterial aus der Ostsee, Nordsee, dem Indischen Ozean oder aus süßem Wasser stammte. 
In den meisten Fällen setzte ich Kreide zu, um die durch die Clostridien erzeugte Buttersäure zu 
neutralisieren; auch kamen zu einigen Kulturen geringe Mengen Ammoniumsulfat. 
Über Volumen und Konzentration der Nährlösungen findet man das Nähere in den bei der 
Besprechung der einzelnen Versuchsreihen zitierten numerierten Tabellen. Für sämtliche Versuche 
benutzte ich Erlenmeyerkolben von verschiedener Größe. Dieselben wurden mit Nährlösung beschickt, mittelst 
Watte verschlossen, im Dampfstrom bei 100° an drei auf einander folgenden Tagen keimfrei gemacht und 
geimpft. Die geimpften Kolben wurden bei Zimmertemperatur (15—20° bezw. 25°) aufgestellt. Zum Teil 
kamen sie in einen dunklen Kasten oder Schrank, einigemal auch in den Thermostaten (27—30°) zu stehen. 
Die Luft hatte entweder durch die Watte ungehinderten Zutritt zur Nährlösung oder wurde auch vorher 
mit Kalilauge und Schwefelsäure gewaschen, ohne daß dadurch das Ergebnis geändert worden wäre. Auch 
einige anaerobe Kulturen wurden angesetzt; es gelangten in diesem Falle die Kulturen unter geräumige 
Glasglocken, innerhalb derer die Luft mittelst alkalischer Pyrogallollösung von Sauerstoff befreit wurde. 
Die Stickstoffbestimmungen führte ich in der Regel nach Kjeldahl aus und brachte nur dann die 
Methode nach Jodlbauer in Anwendung, wenn durch das Einführen größerer Mengen Schlick zugleich 
DrAlfı Koch. ic. S. 16. 
>) Fühling’s Landw. Ztg. 1901. Bd. 1. 
3) Benecke u. Keutner. Über stickstoffbindende Bakterien in der Ostsee. Ber. d. d. bot. G. 1903. Bd. 21. S. 333. 
4) Einige vorläufige Mitteilungen aus meinen Untersuchungen hat bereits Herr Prof. Reinke in folgenden Veröffentlichungen 
gegeben. Reinke: Die zur Ernährung der Meeresorganismen disponiblen Quellen an Stickstoff, und Reinke: Symbiose von Voloox 
und Azotobacter. Ber. d. d. bot. G. Jahrg. 1903. Bd. 21. Heft 7 u. 8. S. 371 bezw. S. 1. Endlich Reinke: Zur Kenntnis der 
Lebensbedingungen von Azotobacter, ebenda Band 22. Heft II. S. 95 ff. 
