34  J. Keutner, Über das Vorkommen und die Verbreitung stickstoffbindender Bakterien im Meere. 8 
gebundenen Stickstoff enthielt. Ein vierter Versuch, in dem Azofobacter und Penicillium eingeimpit 
wurden, gab ebenfalls Stickstoffgewinn, aber etwas weniger als die Azotobacter-Reinkultur (3,5 mg). !) 
Ich will nun an der Hand einer von mir ausgeführten Bestimmung die analytische Methode etwas 
näher ins Auge fassen und ihre Zuverlässigkeit nachweisen. Zu diesem Zwecke wähle ich Versuch Nr. 3 
auf Tabelle Nr. 7. Die geimpfte sowie sterile Kultur wurden genau in der oben beschriebenen Weise 
behandelt. Nach vollendeter Destillation und erfolgter Abkühlung der vorgelegten Schwefelsäure wurde 
die Titrierung vorgenommen. Die = Natronlauge stimmte mit der 3 Oxalsäure überein. 
20 
Die 35 Schwefelsäure hatte den Faktor 1,3 d. h. jedes ccm der vorgelegten en Schwefelsäure 
mußte mit 1,3 multipliziert werden, um einer "/so Normallösung zu entsprechen. 
Bei der geimpften Kultur Bei der sterilen Kultur 
Vorzelegt wurden...) ==. 20 ©. 020m 55 d. h. 20 ccm X 1,31 20. ccm 50 d.h. 202 cemPxel3 
— Pb, ccm 55 Schwefelsäure —DHwceH 56 Schwefelsäure 
Zum Zurücktitrieren wurden gebraucht | 11,7 ccm 56 Natronlauge 25,6 ccm 55 Natronlauge 
Es wurden demnach durch Ammoniak 
nearallalen 6 en al een 55 Schwefelsäure 0,4 ccm 5 Schwefelsäure 
isrcen 55 Schwefelsäure entspricht 
0,0007 g Stickstofl, also ent- 
sprechen). 1... „u, 2. 22] 14,3 cem — 14,3 X 0,0007 0,4 ccm = 0,4 ccm X. 0,0007 
— 10,1 mgr Stickstoff — 0,28 mgr = rund 0,3 mgr 
— rund 10 mgr Stickstoff Stickstoff 
Der Ertrag an gebundenem Stickstoif 
in Kultur III war demnach. . .| 10 — 0,3 = 9,7 mg Stickstoff. 
Ich beschreibe jetzt einige Versuche, durch die ich mich orientieren wollte, an welchen Standorten 
im Meere die stickstoffbindenden Bakterien hauptsächlich zu treffen sind, ob frei im Meerwasser, ob am 
Meeresgrunde oder auf anderen lebenden oder toten Organismen haftend. 
Ich beschickte zu diesem Zwecke 10 Erlenmeyerkolben mit Mannit und den zum Wachstum von 
Azotobacter notwendigen stickstofffreien Nährsalzen, gelöst in 10 ccm Wasser und sterilisierte an drei auf- 
einander folgenden Tagen im Dampfstrom bei 100°. Alsdann filtrierte ich in jeden Kolben 100 ccm frisch- 
geschöpites Meerwasser durch ein steriles Filter. Als Filtrierpapier dienten verschiedene, von der Firma 
Schleicher & Schüll bezogene Proben. Den Rückstand eines jeden Filters, welcher sich nach dem Durch- 
laufen von weiteren 900 ccm Meerwasser ansammelte, spülte ich in je einen der fünf Parallelkolben und 
füllte letztere ebenfalls zu 100 ccm auf. Die Kulturen wurden 6 Wochen hindurch bei Zimmertemperatur 
(15—20°) aufbewahrt. Während dieser Zeit konnte man in den Kolben, welche mit dem Filterrückstande 
geimpft worden waren, ein üppiges Wachstum von Bakterien wahrnehmen. Die Kolben der Parallelreihe 
blieben klar. 
Die mikroskopische Untersuchung zeigte, daß in den getrübten Kolben sowohl Azofobacter als auch 
Clostridien vorhanden waren, während in den übrigen Kulturen kein Wachstum von Organismen nach- 
gewiesen wurde. 
1) Ein ähnliches Resultat der Hemmung der Stickstoffbindung durch Gegenwart von Penicillium erzielten Gerlach und 
Vogel, vergl. Bact. Ctl. II. Bd. X. 1903. S. 641/42. 
