36  J. Keutner, Über das Vorkommen und die Verbreitung stickstoffbindender Bakterien im Meere. 10 
Beim Entfernen des Wattepfropfens von den Kulturkolben wurde ein unreiner, wenig angenehmer Butter- 
säuregeruch wahrgenommen. Kurz gesagt, es traten nach dem Impfen mit Schlick in eine geeignete Nähr- 
lösung dieselben Erscheinungen auf, wie sie in den Untersuchungen Winogradsky’s!) und Beijerinck’s!) 
geschildert wurden. Wie wir aus der Tabelle Nr. 2 und 3 ersehen, ergab die analytische Stickstoffbestim- 
mung eine reichliche Zunahme an gebundenem Stickstoff. Auch wirkte die Zugabe von Kreide sehr günstig, 
was sich bei der kräftigen Buttersäuregährung voraussehen ließ. Ferner wurde in den Fällen, in welchen 
geringe Mengen stickstoffhaltiger Salze anfänglich zugegeben wurden, der Ertrag an gebundenem Stickstoff 
bedeutend in die Höhe getrieben. Die einzelnen Zahlen zeigen zwar unter sich wesentliche Unterschiede; 
jedoch darf dies bei Mischkulturen nicht Wunder nehmen, da auch andere Forscher zu denselben Resultaten 
kamen. Die Zugabe von 4 g Dextrose oder Mannit in die Nährlösungen muß als etwas zu hoch ange- 
nommen werden, indem keiner der beiden Nährstoffe vollständig aufgebraucht war. 
Es lag zunächst die Frage nahe, ob in meinen Kulturen dieselben Organismen wie in den von 
Beijerinck und Winogradsky tätig waren oder ob es sich um andere, vielleicht speziell an Meerwasser 
angepaßte Formen, handelte. 
Diese Frage wurde mit Hilfe von Kulturen in folgender Weise zu beantworten gesucht. 
Ich stellte eine Reihe stickstofffreier Nährlösungen her, welche als Lösungsmittel teils Meer-, teils 
Leitungswasser enthielten. Die Meerwasserkulturen wurden hierauf mit Gartenerde und diejenigen Kulturen, 
welche Leitungswasser enthielten, mit Meeresschlick beimpft. Nach kurzer Zeit konnte man in sämtlichen 
Kulturen gleichartiges Wachstum und dieselben Gährungserscheinungen beobachten. Der mikroskopische 
Befund bestätigte die aus diesem Kulturverlauf herausgelesene Vermutung, daß es sich um dieselben oder 
nahe verwandte Organismen, wie sie auf dem Lande vorkommen, handelte. 
Es zeigte sich, daß die bereits auf dem Festlande durch ihre stickstoffbindende Tätigkeit bekannten 
Formen vorhanden waren. 
Die Art und Weise, wie die Identifizierung jener Bakterien mit den genannten Formen ermöglicht 
wurde, soll zum Schluß der Arbeit in dem Kapitel: „Speziellere Eigenschaften der stickstoffbindenden 
Bakterien“ genauer dargelegt werden. Hier mögen folgende kurze Angaben genügen. 
Man konnte stets beobachten, daß Azofobacter Chroococcum ein besonders üppiges Wachstum in 
Mannitkulturen entfaltete; auch waren die im Niveau der Nährlösung an der Glaswand gebildeten, gelblich- 
weißen Massen der Hauptsache nach auf die Anwesenheit unzähliger Azotobacterzellen zurückzuführen, 
während die Clostridien, die keineswegs fehlten, in den Kulturen mit Dextrose zu kräftigerem Wachstum 
Veranlassung gaben. 
Als aerobe Form übt demnach Azotobacter seine stickstoffassimilierende Tätigkeit mehr in der 
Oberfläche der Kultur aus, während Clostridium Past. als bekanntlich obligat anaerobiotisches Buttersäure- 
bakterium, stets am Boden der Nährlösung anzutreffen ist. Es bildet daselbst graulich-weiße „Kefirkorn 
ähnliche“, oft Kahmhautartige Fetzen, welche zuweilen durch die aufsteigenden Gasblasen an die Oberfläche 
gerissen werden. 
Ob und wie weit die zahlreich anderen, nebenbei auftretenden Bakterien sich an der Stickstoff- 
assimilation beteiligen oder auch in der einen oder anderen Weise die stickstoffbindende Tätigkeit von 
Azotobacter und Clostridium zu fördern im Stande sind, kann nur durch die entsprechenden Reinkultur- 
versuche entschieden werden. 
Nachdem hiermit der Beweis erbracht ist, daß eine stickstofffreie Nährlösung durch Infektion mit 
geringen Mengen Meeresschlick aus der Kieler Bucht sich beträchtlich auf Kosten von freiem atmosphärischem 
Stickstoff anreichert, nachdem ferner das Vorhandensein von Clostridium Pasteurianum und Azotobacter 
chroococcum nachgewiesen worden ist, lag die Frage sehr nahe, ob auch solche Bakterien in Meeresschlick- 
proben anderer Gegenden von derselben physiologischen Befähigung vorhanden seien. 
Ich untersuchte solche Proben, welche aus anderen Teilen der Ostsee, Nordsee und des Indischen 
Ozeans stammten. Dabei benutzte ich die Gelegenheit, auch einige vorläufige Erfahrungen zu sammeln 
über das Vorkommen von Azofobacter oder ähnlichen Organismen auf dem Festlande anderer Kontinente. 
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