38  J. Keutner, Über das Vorkommen und die Verbreitung stickstoffbindender Bakterien im Meere. 12 
impften, am Boden liegenden Fetzen sich mit einem dünnen Häutchen überzogen, welch letzteres an Aus- 
dehnung immer mehr zunahm. Bis dahin war die Flüssigkeit vollständig klar; auch konnte man eine 
Auflösung der zugesetzten Kreide nicht beobachten. Nach weiteren 7 Tagen hatte die Nährlösung bereits 
eine durch Bakterien hervorgerufene Trübung erfahren. Es bildete sich nun auch auf der Oberfläche der 
Nährlösung ein dünnes Häutchen. Letzteres wurde immer größer und stieß nach einigen Tagen an der 
Glaswand an. Die weitere Entwicklung war ganz dieselbe, wie die bei den Schlickkulturen geschilderte, 
doch trat die Gasentwicklung später ein und zwar erst dann, als der Gallertring an der Innenwandung des 
Gefäßes bereits gebildet war und die Flüssigkeit sich deutlich getrübt hatte. 
Auch die mikroskopische Untersuchung zeigte, daß sowohl Clostridium als auch Azotfobacter vor- 
handen waren. Jedoch konnte man beobachten, daß Azofobacter stärker vertreten war, als in den Schlick- 
kulturen. Er war auch hier hauptsächlich an der Oberfläche zu finden. Außerdem bildeten sich im unteren 
Teile der Flüssigkeit, dicht an der Wandung des Gefäßes herabhängende, über den Boden sich hinziehende 
Kahmhäute. Letztere bestanden in den oberen Partien fast nur aus Azotobacterzellen, während die unteren 
Teile mehr oder weniger mit Clostridien und stäbchenförmigen Bakterien untermischt waren. 
Wie aus Tabelle Nr. 5 zu ersehen ist, hat ein ganz ansehnlicher Stickstoffgewinn in den einzelnen 
Kulturen stattgefunden. 
Nachdem nun die Tatsache, daß Azofobacter an der Oberfläche von Aydrolapathum sanguineum 
lebt, festgestellt wurde, war es wichtig” zu erfahren, ob andere Algen, sowie auch Tiere des Meeresgrundes 
sich ebenso verhielten. 
Als weitere Versuchsobjekte dienten außer Aydrolapathum sanguineum, Polysiphonia elongata, 
Cystoclonium purpurascens, Fucus serratus, Laminaria flexicaulis, sämtlich aus der Ostsee; ferner ein 
Seestern und ein Mytilus. 
Kleine Stückchen davon wurden genau abgewogen, in Parallelkulturen gebracht, und nachdem die 
Parallelreihe nochmals sterilisiert war, bei Zimmertemperatur (20—25°) sich selbst überlassen. 
Wie zu erwarten war, fingen die Kulturen bald an sich zu trüben. Wiederum bemerkte man, daß 
sich das eingeimpfte Fetzchen eines Algentallus mit einem dünnen Häutchen überzog. Der weitere Vorgang 
war ganz analog dem vorher beschriebenen mit Aydrolapathum. 
Die mikroskopische Untersuchung stellte die Anwesenheit von Azotfobacter chroococcum und 
Clostridium Pasteurianum in sämtlichen Kulturen fest. Auch hierbei konnte man die Beobachtung machen, 
daß Azotobacter stets in der Überzahl vorhanden war. 
Die Stickstoffbestimmung nach Kjeldahl bestätigte die Annahme, daß eine Bindung des atmo- 
sphärischen Stickstoffs stattgefunden hatte. Wie wir aus Tabelle Nr. 5 ersehen, ist letzterer ein sehr 
beträchtlicher. 
Da Azofobacter sich derart rasch und kräftig entwickelte, daß in kurzer Zeit die ganze, in der 
Flüssigkeit umhertreibende, organische Masse zum größten Teil aus Azotobacterzellen bestand, lag die 
Vermutung sehr nahe, daß es möglich sei, jenen so charakteristischen Spaltpilz direkt mikroskopisch in 
dem Schleime der Algen nachzuweisen. 
Ich schabte mit einem Skalpell vorsichtig den Schleim von der betr. Alge ab und betrachtete ihn 
unter dem Mikroskop. Dabei ist es mir einigemal gelungen, die eigenartig gestalteten Azotobacterzellen 
ganz deutlich nachzuweisen; außer auf //ydrolapathum sanguineum ganz besonders auf Laminaria flexicaulis, 
auf welch letzterer Pflanze dieser Organismus besonders reichlich vertreten war. Auch in den mit Bruch- 
stücken von Seesternen und Mytilus angesetzten Kulturen konnte ich die Gegenwart von Azofobacter und 
Clostridium feststellen. 
Das Ergebnis, daß stickstoffbindende Bakterien auf den festsitzenden Algen der Ostsee vorkamen, 
veranlaßte mich Versuche anzustellen mit Algen aus der Nordsee. Zu diesem Zwecke wurden von der 
biologischen Station zu Helgoland durch Herrn Dr. Kuckuk einige Algen übersandt. 
Es waren dies: Plocamium coccineum, Furcellaria fastigiata, Desmarestia aculeata, Chondrus 
crispus, Lithothamnion Sanderi, Fucus serratus, Corallina vulgaris, Delesseria alata, Polyides rotundus, 
Dictyota dichotoma, Halidrys quadrivalvis, Laminaria saccharina, Scytosiphon lomentarius, Enteromorpha 
linza, Porphyra laciniata, Ceramium rubrum. 
