17 _ J. Keutner, Über das Vorkommen und die Verbreitung stickstoffbindender Bakterien im Meere. 43 
aeroben Bazillus, der Fig. 5a und c sowohl in wachsendem Zustande als auch in Sporenbildung und Sporen- 
keimung dargestellt ist. Es handelt sich um eine Form, die bei Jodzusatz sich intensiv braun färbt, 
manchmal auch einen deutlichen Stich ins Blaue zeigt. Während Reinkulturen desselben keine Stickstoff- 
bindung erwiesen, konnte in Mischkulturen mit Clostridium Pasteurianum eine solche nachgewiesen werden. 
Offenbar ermöglichte die Gegenwart des genannten Bazillus dadurch, daß er dem Clostridium Pasteurianum 
Sauerstofffreiheit verschaffte, diesem seine stickstofibindende Tätigkeit zu entfalten, ganz ebenso wie in 
den von Winogradsky') beschriebenen Kulturen. 
Es folgt nun noch die Besprechung einiger Versuchsreihen, die den Einfluß von Zeitdauer und 
Nährlösungkonzentration ergeben sollen. 
Um den Einfluß der Kulturdauer auf die Höhe der Stickstoffbindung zu ermitteln, beschickte ich 
12 geräumige Erlmeyerkolben mit je 200 ccm Nährlösung und impfte sie nach vorausgegangener Sterilisation 
mit geringen Mengen Schlick. Die Kulturkolben wurden bei Zimmertemperatur (20—25° bezw. 15—20°) 
in einem dunklen Kasten aufbewahrt, um eine möglichst gleichmäßige Entwicklung der Bakterien herbei- 
zuführen. 
Schon nach drei Tagen begann die Flüssigkeit sich zu trüben und allmählich traten auch ganz 
dieselben Erscheinungen ein, wie ich sie bei allen übrigen Schlickkulturen beobachtet hatte. Nach Verlauf 
von 16 Tagen wurden die beiden ersten Kolben analysiert, nachdem ich mikroskopisch die Gegenwart von 
Azotobacter und Clostridium festgestellt hatte. 
Wie man aus Tabelle Nr. 12 ersieht, hat in der kurzen Zeit von 16 Tagen eine Zunahme von 
5 mg Stickstoff stattgefunden. Es war in den beiden Kulturen noch eine reichliche Menge Zucker vor- 
handen, was man beim Zersetzen mit Schwefelsäure leicht erkennen konnte. Die beiden nächsten Kolben 
II und IV wurden 14 Tage später in gleicher Weise der Analyse unterworfen und ergaben einen Gewinn 
von ca. 6 mg Stickstoff. Man sieht also, daß die Zunahme an gebundenem Stickstoff diesmal, gegenüber 
Kultur I und II, eine geringere ist. Kultur V und VI, die nach weiteren 17 Tagen analysiert wurden, 
ergaben in Mitte 8'/» mg Stickstoff, d. h. wiederum eine geringe Zunahme. Diese langsame Zunahme 
ließ sich weiter verfolgen bis zu der Kultur IX und X, d. h. bis zu einer Kulturdauer von ca. '/s Jahr. Dann 
war eine weitere Zunahme nicht mehr zu konstatieren. Es zeigt sich also, daß in den allerersten 16 Tagen 
bereits die Hälfte des gesamten Stickstoffgewinns erreicht war, dann nur noch eine langsame Zunahme 
stattfand. 
Der geschilderte Verlauf der Kurve des Stickstofigewinns erklärt sich wohl so, daß durch die starke, 
allmählich eintretende Säuerung die Tätigkeit der stickstoffbindenden Bakterien gehemmt wird und daß in 
der letzten Zeit der Kultur andere Bakterien die Oberhand gewonnen hatten; dies ergab die Beobachtung, 
daß der Buttersäuregeruch verschwand, statt dessen Schwefelwasserstoffgeruch mehr und mehr überhand nahm; 
es trieben also jedenfalls eiweißzersetzende und sulfatreduzierende Formen ihr Wesen in den alternden Kulturen. 
Weiter untersuchte ich den Einfluß der Konzentration des Zuckers auf die Stickstoffbindung. Solche 
Versuche mit Reinkulturen von Azofobacter liegen bereits vor von Gerlach und Vogel?) Diese fanden 
das Maximum der Stickstoffbindung bei Darbietung von 12 gr Dextrose im Liter. 
Ich arbeitete mit Schlickrohkulturen, die mit verschiedenem Gehalt an Traubenzucker hergestellt 
waren. Als Stammlösung diente Ostseewasser mit den üblichen stickstofffreien Nährsalzen. Außerdem 
wurden zu Kolben I 2 gr Traubenzucker, zu Kolben II 4 gr, zu Kolben III 8 gr, zu Kolben IV 12 gr und 
zu Kolben V 16 gr Traubenzucker beigegeben. Die Versuchsdauer betrug 144 Tage. Geimpft wurde mit 
geringen Mengen frischgefischtem Ostseeschlick. Mit Ausnahme von Kolben V mit 16 gr Traubenzucker, 
konnte nach 5 Tagen ein lebhaftes Wachstum wahrgenommen werden. Einige Tage später fing auch 
Kultur V an sich zu trüben. Nach Verlauf von 14 Tagen zeigten die Kulturen folgendes Aussehen: 
Am kräftigsten war das Wachstum in Kolben I, II und III. Auch war die Gährung in diesen drei 
Kulturen eine ziemlich gleichmäßige, was sich sehr schön an dem Auflösen des zugesetzten Calciumcarbonats 
l)].c.» 
2) Bact. Ctl. Abt. II. Bd. IX. 1902. S. 819. 
