M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bai<terien. 277 



nicht nur eine ernährende Wirkung ausüben, sondern auch die Humusbiidung begünstigen, eine reichere 

 Entwickeiung der Fäulnisbaktcricn bewirken, die Azotobacter mit assimilierbarem Kohlenstoff versehen, und 

 auch rein physikalisch durch Auflockerung des Bodens vorteilhaft sein. 



Thiele (1. c.) hat in Nährlösungen ohne besonderen Kalkzusatz Stickstoffzunahmen durch Azotobacter 

 erfahren. In einer Nährlösung von der Zusammensetzung: Wasser 1000, Dikaiiumphosphat 0,5, Magnesium- 

 sulfat 0,5 sind nach seinen Angaben 44,017 resp. 47,979 mg Stickstoff gebunden worden. An einer anderen 

 Stelle bemerkt Thiele, daß Kalk „eine anregende, vielleicht eine Reizwirkung ausübt", aber nur bei An- 

 wesenheit von Mannit; neben Traubenzucker hat Kalk keine günstigen Resultate ergeben. Diese Angaben 

 stehen in Widerspruch mit den schon oben erwähnten Befunden Stoklasas^), der bei Zusatz von Calcium- 

 carbonat oder Natriumcarbonat zur Nährlösung eine ausgiebigere Stickstoffbindung bei d-Glukose als bei 

 Mannit feststellte. 



Da ich später auf die für das Gedeihen von Azotobacter notwendigen Mineralstoffe nicht mehr 

 zurückkomme, möchte ich hier bemerken, daß es mir ohne Schwierigkeit gelang, Azotobacter in scheinbar 

 ganz kalkfreien Nährlösungen zu kultivieren. Die Kulturflüssigkeit bestand aus 100 cbcm doppelt-destilliertem 

 Wasser, 0,05 g Dikaiiumphosphat und 2 g Mannit. Da in solcher Kulturflüssigkeit trotzdem ein lebhaftes 

 Wachstum dieses Organismus eintrat, was ohne Anwesenheit von Calcium nicht möglich gewesen wäre, 

 muß die nötige Menge dieser Substanz entweder aus der Wand der Kulturkolben in Lösung gegangen 

 oder durch andere unvermeidliche Verunreinigungen in die Nährlösungen gelangt sein. Falls also, woran 

 nach Angabe der Autoren kaum zu zweifeln ist, Calcium wirklich notwendig ist, so genügen jedenfalls die 

 geringsten Spuren dieses Stoffes, um das Kalkbedürfnis von Azotobacter zu befriedigen. Im allgemeinen 

 habe ich die Beobachtung gemacht, daß ein Zusatz von 0,1 % kohlensaurem Kalk zur Nährlösung das 

 Wachstum des Spaltpilzes fördert. 



Über den Einfluß von Natriumchlorid auf das Gedeihen von Azotobacter sind bisher noch keine 

 bestimmten Resultate bekannt. Ich verweise hier auf die Ausführungen auf Seite 281. 



Für unentbehrlich zum Gedeihen von Azotobacter gilt im allgemeinen auch Magnesium. Doch hat 

 Thiele (I. c.) in magnesiumfreien Nährlösungen Azotobacter kultiviert. In einer Nährlösung von der Zu- 

 sammensetzung: 1000 Wasser, 0,5 Dikaiiumphosphat, 0,5 Calciumcarbonat wurden 65,573 resp. 74,178 mg 

 Stickstoff durch Azotobacter gebunden. — Die Kulturflüssigkeit meiner auf Tabelle 8 verzeichneten Kulturen 

 enthielt ebenfalls kein Magnesium, trotzdem fand in ihnen ein Wachstum von Azotobacter statt. Dieses 

 Ergebnis scheint mit dadurch beeinflußt zu sein, daß die Kolben aus Jenenser Glas vielleicht Magnesium 

 haben in Lösung gehen lassen. Deshalb bieten diese Kulturen keinen sicheren Beweis, daß Magnesium 

 fehlen kann. 



Während Beijeri nck und van Delden^^) Azotobacter die Fähigkeit, Anlaß zu einer beträcht- 

 lichen Stickstoffbindung zu geben, absprechen, die Bindung von Stickstoff in Mischkulturen auf Symbiose 

 von Azotobacter mit anderen Bakterien beruhend annehmen, glauben Gerlach und Vogel, Koch, 

 Kröber, Freudenreich und Stoklasa zum Teil eine beträchtliche Stickstoffzunahme in Reinkulturen 

 von Azotobacter festgestellt zu haben. Auch Keutner gibt in seiner Arbeit an, daß es ihm „mit Leichtig- 

 keit gelang, Azotobacter chroococcum aus diversen Erdproben des botanischen Gartens zu Kiel zu isolieren 

 und die Stickstoffbindung durch Reinkultur zu beweisen". Der Stickstoffgewinn schwankte in einprozentigen 

 Mannitkulturen zwischen 1 und 4 mg auf 100 cbcm. Thiele 2) erzielte als Höchstleistung eine Bindung 

 von 74,178 mg pro Liter bei Darbietung 15 g Mannit. 



Alle Angaben aber stimmen darin überein, daß die Ausbeute an gebundenen Stickstoff eine größere 

 ist in Mischkulturen als in Reinkulturen von Azotobacter. Von den Symbionten haben nach Angabe von 

 Beij erinck 11) alle Arten der Gattung Granulobacter die Fähigkeit, für sich Stickstoff zu binden, die 

 durch Symbiose mit Azotobacter erst vollkommen wird. Bac. aerogenes und radiobacter sollen in Reinkultur 

 keinen Stickstoff binden können und diese Fähigkeit erst durch Symbiose mit Azotobacter erlangen. 

 Über die gegenseitige Beeinflussung der Symbionten in der Kombination Granulobacter -\- Azotobacter 

 heißt es ferner, daß wenige Stäbchen von Granulobacter genügen, um ein lebhaftes Wachstum von 

 Azotobacter zu veranlassen. Das erste Assimilationsprodukt von Granulobacter ist, nach einer bis jetzt 

 unbewiesenen Hypothese Beijerincks, flüssig und wird als solches von Azotobacter und den anderen 



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