280 M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 8 



destillierte Wasser ohne nochmalige Destillation Anwendung. Dieses Wasser enthielt in 500 cbcm 0,25 mg 

 Ammoniakstickstoff, d. i. 0,304 mg Ammoniak. Bei allen Analysen wurden gleiche Mengen Wasser 

 verbraucht. 



Vorkommen und Verbreitung von Azotobacter chroococcum. 



a) Vorkommen von Azotobacter auf Algen der Ostsee. 



Das Vorhandensein von Meeresorganismen, welche befähigt sind, den freien Stickstoff zu assimilieren, 

 ist zuerst von Benecke und Keutner") für die westliche Ostsee nachgewiesen worden. Stickstofffreie 

 Nährlösungen mit Schlick von verschiedenen Stellen des Meeresbodens oder mit frischem Plankton beimpft, 

 zeigten nach einigen Tagen eine mehr oder minder reich entwickelte Bakterienflora. Die Hauptmasse der 

 Bakterien bestand aus Azotobacter chroococcum, auch war Clostridium Pasteurianum in den meisten 

 Kulturen nachweisbar, konnte jedoch in den mit Plankton beimpften Kulturen fehlen. Als besondere Art 

 wird noch Clostridium giganteum (S. 34) erwähnt, das durch seine Größe in die Augen fällt. Die chemische 

 Analyse ergab in allen Fällen eine Zunahme an gebundenen Stickstoff gegenüber den sterilen Parallel- 

 kulturen. Ferner berichtet Keutner (1. c.) über das Vorkommen von Azotobacter in anderen Teilen der 

 Ostsee, in den Küstengewässern der Nordsee und des Indischen Ozeans. Man geht wohl nicht fehl in der 

 Annahme, daß dieser Spaltpilz überall im Meere vorkommt und eine Rolle bei den Stickstoffumsetzungen 

 im Meere spielt; in welcher Weise er hierbei beteiligt ist, konnte mit Sicherheit bis jetzt noch nicht fest- 

 gestellt werden. Aus den Versuchen von Keutner scheint jedoch hervorzugehen, daß er für gewöhnlich 

 nicht frei im Ostseewasser vorkommt, sondern daß er auf der Oberfläche von Algen, Planktonorganismen 

 etc. lebt. Vielleicht ist die Gemeinschaft eine so innige, daß Azotobacter einen Teil des assimilierten 

 Stickstoffs direkt an den Wirt abgibt, während dieser die für jenen unentbehrlichen Kohlenstoffverbindungen 

 liefert, i«) 



Diese Annahme wird durch die Untersuchungen Keutners an Algen der Ost- und Nordsee unter- 

 stützt, welche das Ergebnis hatten, daß Azotobacter an der Oberfläche folgender Algen gefunden wurde: 

 Hydrolapathum sanguineum, Polysiphonia elongata, Cystoclonium purpurascens. Fucus serratus, Laminaria 

 flexicaulis aus der Ostsee ; Plocamium coccineum, Litlwthamnioii Satideri, Fucus serratus, Corallina vulgaris, 

 Delesseria alata, Polyides rotundus, Dictyota dichotoma, Halidrys quadrivalvis, Laminaria saccharina, 

 Scytosiphon lomentarius, Enteromorpha linza, Porphyra laciniata, Ceramium rubrum aus der Nordsee. 

 Auf Veranlassung von Herrn Geheimrat Reinke setzte ich diese Untersuchungen fort und sammelte auf 

 einer vom botanischen Institut im Juni 1904 unternommenen Exkursion in die Kieler Bucht eine Anzahl 

 von Algen, die bis auf Fucus serratus noch nicht auf das Vorkommen von Azotobacter untersucht waren. 

 Es waren dies: Fucus vesiculosus, Fucus serratus, Ceramium rubrum, Phyllophora Brodiaei, Delesseria 

 alata und Delesseria sanguinea, die von verschiedenen Stellen der Kieler Bucht stammten. 



Von diesen Algen wurden zunächst kleine, ca. 20 bis 25 qmm große Thallusstückchen mit einem 

 sterilen Skalpell ausgeschnitten und mit einer sterilen Platinöse in Nährlösungen von folgender Zusammen- 

 setzung gebracht: reines filtriertes Ostseewasser 100 cbcm, Mannit 3 g, Dikaliumphosphat 0,1 g, Magne- 

 siumsulfat 0,05 g, Kreide 0,2 g; je 100 cbcm dieser Nährlösung wurden in entsprechende Erlenmeyerkolben 

 gefüllt, diese mit einem Wattebausch verschlossen und an drei aufeinander folgenden Tagen je 15 Min. 

 lang im Koch'schen Sterilisierapparat im Dampfstrom erhitzt. Nach dem Beimpfen wurden die Kulturen 

 bei Zimmertemperatur aufbewahrt. Nach Ablauf von 5 Tagen begannen die Kolben, welche mit Thallus- 

 stückchen von Fucus vesiculosus, Fucus serratus und Delesseria alata beimpft waren, sich zu trüben, auch 

 bemerkte man einzelne an der Oberfläche der Flüssigkeit treibende kleine Häutchen und einen in der Höhe 

 der Flüssigkeit der Glaswand des Kolbens anhaftenden Ring von durchsichtig gallertiger Beschaffenheit. 

 Die mikroskopische Untersuchung ergab, daß die Häutchen und der Ring hauptsächlich aus Azotobacter- 

 zellen bestanden. In der Mitte der Kultur waren diese nicht so reichlich vertreten, hier fanden sich ver- 

 schiedene Begleitbakterien in großer Anzahl vor. Von diesen fielen unter anderen besonders vier Formen ins 

 Auge, die auch in allen übrigen Kulturen anzutreffen waren: eine sehr kleine kokkenförmige und eine kleine 

 stäbchenförmige Art, die beweglich war und oft in Form von Doppelstäbchen auftrat; regelmäßig fanden 



