282 M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 10 



material, welches aus einer noch nicht alten Schlickkultur stammte und vorwiegend aus Azotobacterzellen 

 bestand. Zu den 1 und 10% Kochsalz enthaltenden Kulturen wurden Parallelkulturen hergestellt, die 

 nach dem Beimpfen sofort wieder sterilisiert wurden. Ein Unterschied im Stickstoffgehalt beider stellte 

 sich nicht heraus, woraus zu schließen ist, daß das verwendete, von Kahl bäum bezogene Natriumchlorid 

 stickstofffrei ist. 



In den Kulturen 1—5 war ein Wachstum erst verhältnismäßig spät wahrzunehmen (nach 14 bis 20 

 Tagen); später stellte sich auch in Nr. 6 und 7 eine Trübung ein. Nach einiger Zeit bildete sich auch an 

 der Oberfläche dieser Kulturen eine Kahmhaut aus, und ein am Rande festklebender Ring wurde sichtbar. 

 Bemerkenswert ist, daß sich die Azotobacterkahmhäute in den Kolben 5—8 bei zunehmendem Alter nicht 

 verfärbten. Die mikroskopische Untersuchung zeigte in allen Kulturen die Anwesenheit von zahlreichen 

 Azotobacterzellen an. Ihr Aussehen war überall das gleiche, und es konnte kein Unterschied in der Ein- 

 wirkung der größeren gegenüber den geringeren Konzentrationen von Kochsalz auf die äußere Gestalt und den 

 Inhalt der Azotobacterzellen gefunden werden. In den Kolben 7, 8 und 9 hörte die Bakterientätigkeit bald 

 auf, und es blieb bei einer leichten Trübung der Kulturflüssigkeit. Im 10. Kolben war weder makroskopisch 

 noch mikroskopisch die Anwesenheit von Bakterien nachzuweisen. Die Analyse ergab, daß das Wachstum 

 in Kolben No. 2 am stärksten war; es sind hier 4,1 mg N durch Azotobacter und die übrigen stickstoff- 

 sammelnden Bakterien gebunden worden. In Kolben No. 3 bis 6 war der Stickstoffgewinn ziemlich gleich; 

 in No. 7, 8 und 9 war er gering, und in No. 10 war kein Stickstoff mehr gebunden worden. Die Ergeb- 

 nisse der Analysen sind in Tabelle 1 zusammengestellt, und außerdem noch zu besserer Übersicht in Form 

 einer Kurve (No. 1) zur Darstellung gebracht worden. Auf der Abzissenachse sind die Prozente des 

 Natriumchlorids abgetragen, auf der Ordinatenachse die Milligramme des gewonnenen Stickstoffs. Wie man 

 sieht, steigt die Kurve von 1 bis 2, erhält bei 2 einen scharfen Knick und fällt steil ab bis 3, um sich 

 von da ab allmählich der Abzissenachse zu nähern. 



Da aber Seesalz außer Natriumchlorid noch eine Anzahl anderer Bestandteile enthält, und somit bei 

 größeren Konzentrationen auch der Gehalt der Nährlösung an Magnesiumsalzen steigt, so war zu unter- 

 suchen, ob auch bei Darbietung von größeren Mengen Seesalz Azotobacter eine ähnliche Anpassungs- 

 fähigkeit zeigte, wie in den Kochsalzkulturen. Die Zusammensetzung der Kulturflüssigkeit war die gleiche 

 wie bei diesen, an Stelle von Natriumchlorid wurde das käufliche Seesalz verwendet. Das im gewöhnlichen 

 Zustande feuchte Salz wurde bei 80" 2 Stunden lang getrocknet, dann fein verrieben und der Nährlösung, 

 die vorläufig ohne Kreide war, in Mengen von 1 bis 10% zugesetzt. Nachdem diese filtriert war, wurden 

 den einzelnen Kolben noch 0,1 % Kreide zugesetzt. Das Impfmaterial war dasselbe wie bei den Kochsalz- 

 kulturen. Kolben Nr. 1 bis 3 trübten sich nach 14 Tagen; die übrigen bis Nr. 8 etwas später, Nr. 9 und 

 10 blieben klar. Außer in diesen beiden war Azotobacter in allen Kulturen nachzuweisen. Auch hier 

 zeigten die Azotobacterzellen in den Kulturen mit größerem Salzgehalt nach Form und Inhalt kein anderes 

 Aussehen, wie in den Kulturen mit geringerem Salzgehalt. Ebenso wie bei den Kochsalzkulturen unterblieb 

 das Braunwerden der Azotobacterhäute bei zunehmendem Alter in den Kolben 5 bis 8. Die chemische 

 Analyse ergab eine Zunahme des Stickstoffgehaltes in den Kulturen 1 bis 8. Eine Abweichung von den 

 Kochsalzkulturen hat insofern stattgefunden, als die größte Zunahme an Stickstoff im Kolben Nr. 3 erfolgt 

 ist. Im übrigen ist der Verlauf der Kurve 2 dem der Kurve 1 ähnlich; die Angabe der Analysenresultate 

 enthält die Tabelle Nr. 2. 



Zur Kontrolle dieser Resultate setzte ich noch zwei weitere Versuchsreihen in derselben Weise an, 

 jedoch mit der Abänderung, daß die ersten Kolben 0%, die zweiten 1% die sechsten 5% Koch- 

 salz resp. Seesalz enthielten. Im übrigen waren die Zusammensetzungen der Nährlösungen sowie die 

 Kulturbedingungen dieselben wie bei den oben besprochenen Versuchen. Bei den Kulturen der ersten Reihe 

 ist die höchste Stickstoffbindung in der Kultur eingetreten, die kein Kochsalz enthielt, nämlich 5,1 mg N 

 pro 75 cbcm Nährlösung. Doch abgesehen hiervon ist der Verlauf der Kurve la ein ähnlicher wie von 

 Kurve 1, d. h. zuerst findet ein Ansteigen der Kurve statt bis 2, hier setzt ein plötzliches Abfallen ein, von 

 Nr. 3 an nähert sich die Kurve der Abzissenachse. Die Seesalz enthaltenden Kulturen hatten ein etwas 

 abweichendes Ergebnis. Bei Darbietung von und 1 % war die gebundene Stickstoffmenge dieselbe 

 (4,1 mg), 1 mg weniger enthielten die beiden folgenden Kulturen. Bei noch höherer Konzentration ist der 



