11 M. Kediiig, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bai<terien. 283 



Stickstoffgewinii wie in den übrigen Reiiien gering (Kurve 2a). Die Anaiysenergebnisse sind in den 

 Tabellen la und 2 a zusammengestellt. 



Bei den vorhergehenden Versuchen wurde als Impfmaterial Azotobacter verwendet, der aus Ostsee- 

 schlick stammte und demnach schon auf einen bestimmten Salzgehalt des Kulturmediums abgestimmt war. 

 Daß dieser auch befähigt ist, in Nährlösungen ohne Koch- oder Seesalz Stickstoff zu binden, geht aus den 

 Versuchen Nr. 1 auf Tabelle la und 2a hervor. Es lag nun die Frage nahe, ob andererseits auch die auf 

 dem Festlande lebende Azotobacterspezics imstande wäre, in Nährlösungen mit zunehmenden Konzentrationen 

 von Seesalz zu wachsen und Stickstoff zu binden. Die Versuche in dieser Richtung ließen einen Unter- 

 schied im Verhalten beider Spezies von Azotobacter nicht erkennen. Bis jetzt sind überhaupt noch keine 

 wesentlichen Unterschiede zwischen beiden festgestellt worden, so daß die Annahme gestattet ist, daß 

 man es in beiden Fällen mit derselben Art zu tun hat. Je 75 cbcm Nährlösung von der Zusammensetzung 

 Wasser 100, d-Glukose 2, DikaliumpJiosphat 0,05, Magnesiumsulfat 0,02, Kreide 0,1 enthaltende Kolben 

 wurden mit 0,1, 2 ... . 10% getrocknetem Seesalz versetzt, im Dampfstrom an drei aufeinander folgenden 

 Tagen sterilisiert, dann mit je 0,5 g frischer Gartenerde beimpft. Die Parallelkulturen wurden hierauf noch- 

 mals sterilisiert. Schon nach 8 Tagen war in den Kolben Nr. 1 bis 3 eine Bakterientätigkeit zu bemerken 

 an den aufsteigenden Gasbläschen und an einer leichten Trübung der Kulturflüssigkeit. Nach einiger Zeit 

 begannen sich auch die Kulturen bis Nr. 9 einschließlich zu trüben, dagegen blieben Nr. 10 und 11 klar. 

 Die mikroskopische Untersuchung ergab, daß die entstandene Bakterienflora größtenteils aus Azotobacter 

 bestand. Auch Buttersäurebakterien fehlten nicht, wie schon der intensive Buttersäuregeruch erkennen ließ. 

 Die Zunahme an Stickstoff war bei diesen Versuchen durchschnittlich größer als bei den früheren, bei 

 welchen aus Ostseeschlick stammender Azotobacter als Impfmaterial verwendet war (siehe Tabelle Nr. 3). 

 Der Grund hierfür mag wohl der sein, daß in der Erde, die einem Beete des botanischen Gartens 

 entnommen war, das regelmäßig Stalldünger erhalten hatte, besonders ansprechende Nährstoffe für 

 Azotobacter vorhanden waren. Löhnis^'-) erwähnt, daß er in Kulturen mit Bodenextrakt hohe Stickstoff- 

 gewinne durch Azotobacter in Mischkulturen gewonnen habe, und auch bei den Versuchen von Beijerinck 

 und van Delden") haben die Kulturen, denen pasteurisierte Erde zugesetzt war, eine größere Stickstoff- 

 anreicherung erfahren als die übrigen. 



Die Resultate dieser Versuche sind in der Tabelle 3 und Kurve 3 zusammengestellt. Die höchste 

 Stickstoffbindung hat, wie zu erwarten war, in der Kultur stattgefunden, welcher kein Seesalz zugesetzt war. 

 Auch fehlt nicht das charakteristische Ansteigen der Kurve von 1 nach 2 und von da ab das Abfallen bis 

 zur Abzissenachse, wie die übrigen Kurven zeigen. Eine Ausnahme hiervon macht Kurve 2a, bei der das 

 Ansteigen fehlt. Eine Erklärung für das abweichende Verhalten von Azotobacter in diesen Kulturen konnte 

 nicht gefunden werden. 



Wie diese Versuche zeigen, ist kein wesentlicher Unterschied vorhanden zwischen dem Verhalten 

 von Azotobacter bei Darbietung von Kochsalz und Darbietung von Seesalz in Nährlösungen. Die Ent- 

 wickelung der Kulturen ist kräftiger, und die Bindung von Stickstoff reichlicher bei Abwesenheit von Koch- 

 und Seesalz. Das ist um so bemerkenswerter, als man aus dem Verlauf der Kurven annehmen sollte, sie 

 würden von der Ordinatenachse an allmählich ansteigen bis 2 oder 3 und von da ab wieder fallen. Einen 

 fördernden Einfluß auf das Gedeihen von Azotobacter und den übrigen stickstoffsammelnden Bakterien hat 

 der Zusatz von Koch- und Seesalz offenbar nicht, wie schon erwähnt wurde; dann ist es aber merkwürdig, 

 daß ein Zusatz von 1 "/o ungünstiger wirkt als einer von 2 bis 3 %. Aber auch in den höheren Konzen- 

 trationen bleibt Azotobacter nicht nur am Leben, sondern ist auch befähigt, sich fortzupflanzen und Stick- 

 stoff zu binden. Ein Gehalt der Nährlösungen von 9 und 10 "/o Koch- und Seesalz verhindert das 

 Gedeihen von Azotobacter. 



c) Vorkommen von Azotobacter in verschiedenen Erdproben. 

 Zur Ergänzung der in der Einleitung erwähnten Angaben über die Verbreitung von Azotobacter 

 stellte ich die folgenden Untersuchungen an. Im botanischen Garten zu Kiel konnte ich Azotobacter in 

 allen Erdproben nachweisen. Diese Proben wurden von der Oberfläche, aus 15, 30 und 45 cm Tiefe ent- 

 nommen vom Leguminosen-, Umbelliferen- und Cruci/erenhett Um eine gegenseitige Infektion der Proben 



Wissensch. Meeresuntersuchungen. K. Kommission Abteilung Kiel. Bd. 9. 28 



