284 M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 12 



zu vermeiden, verfuhir ich beim Einsammeln folgendermaßen: 12 sorgfältig gereinigte, mit Watte ver- 

 schlossene Reagenzgläser, die einen zusammengefalteten Streifen Kartonpapier enthielten, der zur Entnahme 

 und Einführung der Erdproben dienen sollte, wurden bei 180° eine halbe Stunde lang im Trockenschrank 

 sterilisiert. Zur Erlangung der Tiefenproben wurde ein Spaten verwendet, der jedesmal mit Wasser 

 gereinigt wurde, und nur die Erde aus der Mitte einer herausgehobenen Scholle wurde benutzt. Mit je 

 0,5 g der so gewonnenen Erdproben wurden sterile Kolben mit der üblichen stickstofffreien Nährlösung 

 geimpft. Die Bakterientätigkeit setzte bald ein, wie die Gasentbindung zeigte; dann traten die bekannten 

 treibenden Membranen auf, die größtenteils aus Azotobacterzellen bestanden. Außerdem aber enthielten 

 die Kulturen noch ein buntes Gemisch von anderen Bakterien. Durch Aussaat auf Agarplatten verschwanden 

 zwar die meisten, aber einige Arten waren von Azotobacter nicht zu trennen. Von ihnen wird weiterhin 

 noch die Rede sein. Ich habe später noch von verschiedenen Stellen des Gartens Erdproben auf Azotobacter 

 untersucht und ihn stets gefunden. Allerdings kann es vorkommen, daß er zu bestimmten Jahreszeiten 

 weit weniger zahlreich ist als sonst, was zur Folge hat, daß oft Wochen vergehen, bis die mit solcher 

 Erde beimpften Kulturen angehen. Z. B. gelang es mir im Juli 1905 nicht, von einem Beet Azotobacter 

 zu isolieren, in welchem er im Februar und März zahlreich vorhanden gewesen war (dies Beet ist schon jahre- 

 lang nicht bepflanzt und nicht gedüngt worden). An Stelle von Azotobacter waren zahlreiche andere 

 Bakterien da, die nicht näher untersucht wurden. Diese Beobachtung stimmt mit der Angabe von 

 Löhnis überein: „Es kann vorkommen, daß — infolge verschieden stark ausgeprägter Fähigkeit der an 

 bestimmten Umsetzungen beteiligten Mikroorganismen — in den Erdproben, die man ein und demselben 

 Felde zu verschiedenen Zeiten entnimmt, bei im übrigen gleich bleibenden Versuchsbedingungen die 

 Änderungen in der Zahl der Bakterien einerseits und des durch diese Organismen hervorgerufenen Effekts 

 andererseits mitunter in grade entgegengesetzter Richtung verlaufen. Besonders auffällig trat diese Tatsache 

 unter den von mir untersuchten Fällen bei der Stickstoffassimilation hervor; trotzdem im Juli 1904 auf 

 der betreffenden mit Kartoffeln bestandenen Parzelle sich bei Benutzung der Hiltner-Störmerschen 

 Verdünnungsmethode in Mannitlösungen etwa 30mal so viel stickstofffixierende Organismen nachweisen 

 ließen als im Januar desselben Jahres, zeigte doch der Effekt eine deutliche Verringerung. Es fehlte 

 Azotobacter, dessen charakteristische Formen sich aus der im Winter entnommenen Erdprobe in der be- 

 nutzten Mannitlösung fast in Reinkultur entwickelten, im Sommer völlig, und es waren an seine Stelle 

 verschiedene kleine Formen getreten." 



Es ist durch die Versuche von Henry*) bekannt, daß abgefallene Eichen- und Buchenblätter, die 

 längere Zeit in Kästen aufbewahrt werden, eine Zunahme an Stickstoff erfahren. Es liegt die Vermutung 

 nahe, daß bei dieser Stickstoffanreicherung unter anderen Stickstoffsammlern auch Azotobacter beteiligt 

 ist, der mit den anhaftenden Erd- und Humusteilchen zwischen die Blätter gelangt. Ich untersuchte 

 daraufhin 24 Proben von Walderde, die aus dem Rönner Gehege bei Preetz stammten, auf das Vorhanden- 

 sein von Azotobacter. Die Erde wurde nach dem oben angegebenen Verfahren an 6 verschiedenen, 

 trockneren und feuchteren Stellen des Waldes von der Oberfläche, aus 15, 30 und 45 cm Tiefe entnommen 

 und in Mengen von ungefähr 0,5 g in sterile stickstofffreie Nährlösungen gebracht. Nach 5 bis 6 Tagen 

 wurde die Bakterientätigkeit in den Kulturen sichtbar. In dem zuerst auftretenden Bakteriengemisch war 

 Azotobacter nicht sehr zahlreich vorhanden, sondern eine Menge anderer Bakterien, Stäbchenformen, kleine 

 Kokken, Plektridien und auch Granulosebakterien, die sich vermutlich auf Kosten der in der Humuserde 

 vorhandenen Stickstoffverbindungen so lebhaft vermehrten, daß sie die Entwickelung von Azotobacter 

 zuerst hemmten. Nach einiger Zeit, als wahrscheinlich die Stickstoffquelle für die anderen Bakterien 

 erschöpft war, trat Azotobacter in den Vordergrund. Er bildete mit anderen zusammen treibende Rohmem- 

 branen, die sich bald zu einer einheitlichen, am Rande des Kulturgefäßes festhaftenden Kahmhaut zusammen- 

 schloßen. Nach 3 Wochen begannen sich die anfangs weißlichen Kahmhäute zu bräunen und wurden 

 schließlich schwarzbraun. 



Das Vorhandensein von Azotobacter und anderen Stickstoffbakterien in der Humuserde ist für die 

 Stickstoffbilanz eines Waldes von großer Bedeutung. Jährlich werden dem Walde große Mengen gebundenen 

 Stickstoffs entnommen, ohne daß dafür entsprechender Ersatz durch Düngung geschaffen würde. Es müßte 

 nun bald ein Mangel an Stickstoff eintreten, wenn nicht durch die Stickstoffsammler der freie Luftstickstoff 



