286 M. Keding, Weitere Untersuchungen über Stickstoff bindende Bakterien. 14 



Impfmaterial verwandt. Bei Lathynis vernus, Phaseolus vulgaris, Pisum sativum kam es in einigen Fällen 

 vor, daß sich Azotobader überhaupt nicht entwickelte. In den übrigen Kulturen war er vorhanden, 

 jedoch sprachen keine Anzeichen dafür, daß er in dem angewandten Impfmaterial zahlreicher wäre als in 

 der Erde von anderen Teilen der Beete. 



Anders gestalteten sich die Versuche, wenn die Wurzeln dieser Pflanzen von der anhaftenden 

 Erde befreit wurden, indem sie ca. 5 Minuten unter der Wasserleitung mit starkem Strahle gespült wurden. 

 In den Nährlösungen, die mit so gereinigten Wurzelstückchen beschickt wurden, entwickelte sich Azotobader 

 überhaupt nicht, und auch keine anderen Bakterien; sie blieben 4 Wochen lang klar. Auch konnte, wenn 

 mit einem sterilen Skapell die obersten Zellschichten der Wurzeln abgeschabt wurden, aus diesem Impf- 

 material Azotobader nicht gewonnen werden. Im gedüngten Gartenboden stehen Azotobader genügend 

 Kohlenstoffverbindungen zur Verfügung, so daß ein engerer Anschluß an die höheren Pflanzen überflüssig 

 wird. Das an solchen Verbindungen um vieles ärmere Meerwasser und der Dünensand können den An- 

 sprüchen an die Ernährung nicht genügen; daher werden von Azotobader solche Stellen aufgesucht, wo 

 günstigere Ernährungsbedingungen vorhanden sind, im Meere die Algen, im Dünensande die Wurzeln der 

 Strandpflanzen. 



In Einklang mit diesen Resultaten stehen die Befunde, welche bei Keimwurzeln gemacht wurden. 

 Hätte sich herausgestellt, daß Azotobader ganz allgemein an der Wurzeloberfläche oder in den obersten 

 Zellschichten der Wurzeln vorkomme, so konnte man vermuten, daß er schon mit den Samen in den Boden 

 gelangt sei, in der Weise etwa, daß in den Gewebeschichten des Samens einzelne im Dauerzustande 

 befindliche Azotobacterzellen vorhanden wären, die sich beim Auskeimen der Wurzeln dann vermehrten. 

 Durch eine Anzahl von Versuchen wurde jedoch festgestellt, daß die Keimwurzeln und folglich auch die 

 Samen frei von Azotobader sind. Die Ausführung dieser Versuche geschah folgendermaßen: eine Anzahl 

 Früchte von Zea Mais und Phaseolus vulgaris wurden mit einer harten Bürste und Seife sorgfältigst ge- 

 reinigt, mit Wasser mehrere Male gewaschen, darauf 2 Minuten lang mit einer 0,1 prozentigen Sublimat- 

 lösung behandelt und schließlich in einem sterilen Gefäß mit sterilem Wasser abgespült. Das Keimen 

 geschah in einem sterilen Glastrog mit feuchtem sterilen Sägemehl, der mit einer Glasplatte bedeckt war. 

 Als die Keimwurzeln ca. 1 cm lang waren, wurden mit einem sterilen Skapell kleine Wurzelstückchen ab- 

 geschnitten und in stickstofffreie Nährlösungen gebracht, in denen jedoch bei einer Kulturzeit von 4 Wochen 

 keine Bakterienentwickelung eintrat. 



Lebensdauer von Azotobacter in trockener Erde. 



Von allen stickstoffassimilierenden Bodenbakterien ist bisher Azotobader chroococcum am meisten 

 zu Untersuchungen benutzt worden, einerseits weil die andern teils schwieriger in Reinkultur zu erhalten, 

 teils hinsichtlich ihrer Kulturbedingungen noch wenig bekannt sind, andererseits weil Azotobader 

 überall vorhanden und mit Leichtigkeit zu identifizieren ist und, wie meistenteils berichtet wird, leicht in 

 Reinkultur kultiviert werden kann. Was in ernährungsphysiologischer Hinsicht über Azotobacter bekannt 

 ist, ist schon in der Einleitung erwähnt worden, ebenso die Abhängigkeit von Temperatur und anderen 

 äußeren Einflüssen. 



Im folgenden soll untersucht werden, ob die Lebensfähigkeit von Azotobader nach längerem Aus- 

 trocknen erlischt, und sein Assimilationsverniögen allmählich abnimmt, oder ob er zu jenen Organismen 

 gehört, die eine längere Trockenperiode unbeschadet aushalten können. Die zu diesen Versuchen erforder- 

 liche Erde wurde am 25. Januar 1905 vom Umbelliferenheet des botanischen Gartens entnommen bei einer 

 Lufttemperatur von —3°. Eine Probe wurde von der Oberfläche des Bodens, der an dieser Stelle gleich- 

 falls eine Temperatur von —3° hatte, entnommen, eine zweite aus einer Tiefe von 20 cm (Temp. — 0°), 

 eine dritte aus einer Tiefe von 35 cm (Temp. —0°) und die letzte aus einer Tiefe von 75 cm, wo der 

 Boden nicht mehr gefroren war (Temp. +l°j. Diese vier Erdproben wurden auf Tellern ausgebreitet, die 

 mit Glasplatten bedeckt, anfangs in einem ungeheizten Räume aufbewahrt wurden, um ein zu plötzliches 

 Auftauen der Erde zu verhindern, was eventuell eine Schädigung der in der Erde vorhandenen Bakterien 

 zur Folge hätte haben können. Weiterhin wurden diese Proben auf einem Bord im geheizten Zimmer 



