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M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 



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(Temp. 20 — 25°) aufbewahrt. Zum Beimpfen der Kolben wurde von allen Tellern je 1 g abgewogen und 

 auf zwei sterile Kolben, die 100 cbcm Nährlösung enthielten, verteilt, von denen dereine dann nochmals sterilisiert 

 wurde; die Nährlösungen bestanden aus 100 cbcrn Leitungswasser, 2 g Mannit oder d-Glukose, 0,05 g 

 Dikaliumphosphat, 0,02 g Magnesiumsulfat, und 0,1 g Calciumcarbonat. Gewöhnlich wurden in jedem 

 Monat zweimal Kulturen angesetzt. Die auf den Tellern 1 bis 3 ausgebreitete Erde nahm im lufttrockenen 

 Zustande bald ein graues, krümliches bis feinpulveriges Aussehen an. Die Erde auf Teller 4, die aus einer 

 Tiefe von 0,75 m stammte, war lehmhaltig und sah lufttrocken gelb bis gelbbraun aus. 



Nachdem die zum Impfen angewandten 0,5 g Erde in die Kolben hineingebracht waren, wurden 

 diese kräftig geschüttelt, um eine möglichst feine Verteilung des Impfmaterials in der Kultur zu erlangen. 

 Nach dem Absetzen bedeckten die Erdpartikelchen vermischt mit den Kreideteilchen den ganzen Boden 

 des Kulturgefäßes. Die so beimpften Kulturen wurden dann sich selbst überlassen und standen im Winter 

 bei 20 bis 25 », im Sommer bei 12 bis 20°. 



Der Verlauf der Kulturen war im allgemeinen bei denen, die in der Zeit vom 27. Januar bis zum 

 19. Juli 1905 angesetzt wurden, der gleiche. Nach 4 bis 5 Tagen (im Sommer wegen der niedrigeren 

 Temperatur gewöhnlich etwas später) bemerkte man eine leichte Trübung, bald bildeten sich kleine treibende 

 Membranen aus, aufsteigende Gasbläschen zeigten die beginnende Gärung an; die Membranen schlössen sich 

 zu einer Kahmhaut zusammen, von der einzelne Fetzen nach unten in die Flüssigkeit hineinragten. Die zu- 

 nehmende Zahl der Gasblasen lockerte die Kahmhaut auf, sie zerriß, sank auf den Boden des Gefäßes. 

 Bei den glukosehaltigen Kulturen machte sich gewöhnlich ein intensiver Buttersäuregeruch bemerkbar, der 

 bei den Mannitkulturen fast regelmäßig ausblieb. Nach 3 Wochen begannen sich die Kahmhäute zu verfärben 

 bis sie schließlich ein schwarzbraunes Aussehen annahmen. Die Kalkteilchen ballten sich anfangs zusammen, 

 wurden darauf aber zum Teil wieder aufgelöst. Nach längerem Stehen der Kulturen hörte die Gärung auf, 

 ein Zeichen, daß der vorhandene Zucker verbraucht war. Wie das makroskopische war auch das mikro- 

 skopische Aussehen bei allen Kulturen ungefähr das gleiche, nämlich das der gewöhnlichen aus Erde 

 gewonnenen Rohkulturen. Die Kahmhaut bestand vorwiegend aus Azotobacterzellen, die oft beträchtliche 

 Größenunterschiede zeigten. Daneben war jedoch eine mannigfaltige Bakterienflora vorhanden. Eingehender 

 wurde diese nicht untersucht, und ich beschränke mich hier darauf, die stets wiederkehrenden und am 

 meisten in die Augen fallenden Formen kurz zu schildern. Zunächst bemerkte man spindelförmig an- 

 geschwollene granuloseführende Bakterien, an einem Ende, das nach Jodzusatz farblos blieb, die Sporen- 

 anlage, während das andere Ende sich blauschwarz färbte, möglicherweise also Clostridium Pasteurianum. 

 Sehr zahlreich war auch stets ein anderes schmales, ziemlich langes, ebenfalls granuloseführendes Bakterium 

 vorhanden, das an einem Ende etwas angeschwollen ist und von Keutner (1. c.) Seite 16 Figur 5d ab- 

 gebildet wird. Niemals fehlte auch eine Form, welche das Aussehen von dicken plumpen Stäbchen hatte 

 und wohl ähnlich'ist dem von Thiele'-) beschriebenen Bacterium moleste. Von den zahlreichen sich nur 

 durch ihre Größe unterscheidenden Stäbchen, ist eine häufig zu Doppelstäbchen vereinigte Art auffallend, 

 die sich mittelst Purzelbewegungen fortbewegt, was besonders schön im Hängetropfen zu beobachten ist, 

 wo sie mit Azotobacter die Stellen der größten Sauerstoffspannung aufsuchen. An kokkenförmigen 

 Bakterien waren es besonders 3 Arten, die in allen diesen Kulturen wiederkehrten und die sich durch ihre 

 Größe unterschieden: kleine, mittlere und größere; letztere erreichten ungefähr den vierten Teil der 

 Größe von normalen Azotobacterzellen. Alle drei Formen fanden sich auch öfter zu Diplokokken vereinigt 

 vor. Als Gäste fanden sich zuweilen Flagellaten, Infusorien und andere tierische Organismen ein. 



Von dem Verhalten dieser Kulturen unterschied sich der Verlauf der vom 13. Oktober 1905 ab an- 

 gesetzten. Zunächst machte sich ein Unterschied darin bemerkbar, daß die Kulturen längere Zeit gebrauchten, 

 bevor eine Bakterientätigkeit in ihnen sichtbar wurde. Obwohl im Oktober bei geheiztem Zimmer am 

 Standort der Kolben eine Temperatur von 20 bis 25 » herrschte, begannen sich die Kulturen erst nach 10 

 bis 12 Tagen zu entwickeln. Hieraus konnte man schon den Schluß ziehen, daß mit dem Impfmaterial 

 weniger entwickelungsfähige Bakterien in die Kolben gelangt waren. Die mikroskopische Untersuchung 

 bestätigte diese Annahme. Sie waren „reiner" geworden, dadurch daß die Mannigfaltigkeit der das mikro- 

 skopische Aussehen der vorhergehenden Kulturen bestimmenden Bakterienflora abgenommen hatte. Flagel- 

 laten und die anderen tierischen Organismen fehlten ganz; trommelschlägerförmige Bakterien waren zwar 





