288 M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 16 



noch vorhanden, aber in weit geringerer Anzahl wie vorher; die Arten der stäbchenförmigen Begleiter 

 waren auf zwei reduziert; schließlich waren noch einige granulosespeichernde Bakterien zu bemerken. 

 Zudem war die Zahl dieser Begleitbakterien gering, so daß das mikroskopische Gesichtsfeld vielfach nur von 

 Azotobacterzellen beherrscht wurde, und erst bei genauerem Hinsehen konnte man die übrigen Bakterien- 

 formen entdecken. 



Dieser Unterschied im kulturellen Verhalten der mit verschieden lange ausgetrockneter Erde beimpften 

 Kolben tritt in der chemischen Analyse nicht hervor. Ein Blick auf die Resultate der Analysen auf Tabelle 4 

 läßt erkennen, daß der Stickstoffgewinn der unter ziemlich gleichen Bedingungen gehaltenen Kulturen ein 

 ganz verschiedener ist. Bei zu lang ausgedehnter Kulturzeit können leicht Stickstoffverluste eintreten, wie 

 es vielleicht bei Nr. 33 bis 36 geschehen ist. Jedoch kann man aus diesen Versuchen keinen Schluß 

 über den Einfluß der Kulturzeit auf den Stickstoffgewinn ziehen. Nach einer genügenden Erklärung dieses 

 Schwankens der Resultate sieht man sich auch hier vergebens um. Dennoch haben diese Versuche gezeigt, 

 daß ein längerer Aufenthalt in lufttrockener Erde dem Azotobacter nicht schadet, und daß seine Fähigkeit, 

 Stickstoff zu binden, keine Abnahme erfahren hat. Die Zahl der Begleitbakterien ist geringer geworden, 

 wie sowohl das makroskopische Verhalten der Kulturen wie die mikroskopische Untersuchung ergab. 

 Diese können also offenbar das Austrocknen nicht so gut vertragen wie Azotobacter. Die Anzahl der 

 Azotobacterzellen in der untersuchten Bodenschicht bis zu 75 cm Tiefe scheint mit zunehmender Tiefe 

 größer zu werden; es haben wenigtens die Kulturen, die mit Gartenerde III *) und IV beimpft wurden, 

 durchschnittlich größere Stickstoffanreicherung erfahren als die mit Gartenerde I und II beimpften. Vielleicht 

 sind in den oberen Schichten des Bodens durch den Frost (es hatte, als die Erdproben gesammelt wurden, 

 schon 8 Tage lang anhaltend gefroren) viele Azotobacterzellen zu Grunde gegangen. — Ein Unterschied 

 in der Wirkung von Calcium bei Traubenzucker und bei Mannit, wie ihn Thiele'^) für Reinkulturen von 

 Azotobacter festgestellt hat, scheint für Rohkulturen von Azotobacter nicht zu bestehen. 



Bei diesen Versuchen handelte es sich darum, die Lebensfähigkeit und Aktivität von Azotobacter 

 in lufttrockener Erde zu untersuchen. Die folgenden Versuche wurden angestellt, um das Verhalten von 

 Azotobacter in der Erde bei stärkerem Austrocknen zu prüfen. Von der Gartenerde III aus 35 cm Tiefe 

 wurde ein Teil vom 28. Juni 1905 ab im Exsikkator flach ausgebreitet über Schwefelsäure aufbewahrt. 

 Vom 13. Oktober ab wurden je 0,5 g dieser Erde zum Beimpfen steriler Kulturen verwandt. Auch hier 

 zeigte sich wieder, daß die Kulturen langsamer zur Etwickelung kamen, als die mit frischer Erde beimpften, 

 trotz der günstigen Temperatur. Mikroskopisch konnte festgestellt werden, daß auch hier' die in diesen 

 Kulturen entstandene Bakterienflora wesentlich einfacher aussah wie bei Rohkulturen aus frischer Erde. 

 Es fehlten unter anderen auch die Trommelschlägerformen und war fast nur Azotobacter vorhanden. 

 Demgemäß muß man ihm hier den größten Anteil an der Stickstoffanreicherung zuschreiben, die hinter 

 dem Durchschnitt der auf Tabelle 4 angegebenen Werte nicht zurücksteht (siehe Tabelle 5). Es geht also 

 aus diesen Versuchen hervor, daß ein 160 Tage langes Austrocknen im Exsikkator über Schwefelsäure, 

 welches einem 148 Tage langem Trockenstadium in lufttrockener Erde folgte (wenn man annimmt, daß 

 die Erde am 1. Februar lufttrocken geworden war), der Lebensfähigkeit und Aktivität von Azotobacter 

 keinen Abbruch tun kann. Will man aus dem langsameren Angehen dieser Kulturen auf eine Ver- 

 minderung der Azotobacterzellen in der Erde schließen, so mag darauf hingewiesen werden, daß die Ver- 

 zögerung der Entwickelung auch auf das Zurückgehen der Begleitbakterien zurückgeführt werden kann. 

 In Reinkulturen (flüssigen) habe ich eine Vermehrung der Azotobacterzellen bis zum Sichtbarwerden nur 

 äußerst langam vor sich gehen sehen. 



Daß die im Dauerzustande befindlichen Zellen von Azotobacter auch niedrige Temperaturen er- 

 tragen können, beweist ihr Vorhandensein an der Oberfläche bei — 3 °. Eine Lebenstätigkeit findet bei 

 dieser Temperatur voraussichtlich nicht mehr statt. Warmbold (1. c.) hat bei -j-S" keine Festlegung von 

 Stickstoff durch stickstoffsammelnde Bakterien mehr bemerken können. 



Da Azotobacter das Austrocknen sehr lange verträgt und dadurch wahrscheinlich an Gewicht ver- 

 liert, so wird die Verbreitung durch den Wind zweifellos die häufigste sein. Jede Luftströmung wird leicht 



*) Gartenerde I, II, III und IV bedeutet : Gartenerde aus 0, 20, 35 und 75 cm Tiefe. 



