290 M. Keding, Weitere Untersuchungen über stickstoffbindende Bakterien. 18 



den letzten Jahren unbepfianzt war und infolgedessen auch keinen Dünger erhalten hatte, wurde durch 

 ein feines Sieb geschüttet. Je 250 g hiervon wurden auf 6 Tellern ausgebreitet. Es enthielten: 



Teller Nr. 1 : 250 g Erde. 



Teller Nr. 2: 250 g Erde, gemischt mit 15 g Thomasphosphatmehl. 



Teller Nr. 3: 250 g Erde, gemischt mit 15 g Thomasphosphatmehl, durchtränkt mit 

 25 cbcm 3 prozentiger Mannitlösung. 



Teller Nr. 4: 250 g Erde, gemischt mit 15 g Thomasphosphatmehl, durchtränkt mit 

 25 cm^ 3 prozentiger Mannitlösung. 



Teller Nr. 5: 250 g Erde, gemischt mit 15 g Thomasphosphatmehl. 



Teller Nr. 6: 250 g Erde, durchtränkt mit 25 cbcm 3 prozentiger Mannitlösung. 

 Diese 6 Teller wurden im Autoklaven 30 Minuten lang bei 120° erhitzt; am nächsten Tage wurde 

 jeder mit 25 g frischer Erde bestreut, dann Nr. 4 abermals sterilisiert. Aufbewahrt unter Glasglocken 

 standen sie in einem im Winter nicht geheizten Räume vom 15. Mai bis 20. November 1905. Um das 

 Austrocknen zu verhindern, wurde von Zeit zu Zeit mit je 30 cbcm sterilem destilliertem Wasser begossen. 

 Während der Ferien war folgende Vorrichtung getroffen, die das Austrocknen verhinderte. Nachdem die 

 Erde vorher angefeuchtet war, wurden unter den Glasglocken, mit denen die Teller bedeckt waren, flache 

 Gefäße mit Wasser aufgestellt. Dadurch blieb die Luft unter den Glasglocken stets mit Wasserdampf 

 gesättigt, so daß die feuchte Erde nur sehr wenig Wasser abgab. Am 20. November wurde von jedem 

 Teller 0,5 g Erde entnommen und in sterile stickstofffreie Nährlösungen gebracht, um die entstandene 

 Bakterienflora zu untersuchen. Es zeigte sich, daß die mit Erde vom 4. Teller beimpften Kolben klar 

 blieben, ein Zeichen, daß keine Infektion von außen stattgefunden hatte; da die übrigen Teller unter den- 

 selben Bedingungen aufbewahrt waren, so ist anzunehmen, daß auch bei ihnen keine nachträgliche 

 Infektion stattgefunden hat. Eine Algenvegetation hatte sich nicht eingestellt, da drei Teller im Dunkeln, die 

 übrigen drei bei sehr schwachem Lichte standen. 



Ich will zunächst das Aussehen der auf den einzelnen Tellern entstandenen, in stickstofffreier Nähr- 

 lösung gewachsenen Bakterienflora besprechen. Die Kulturflüssigkeit blieb, nachdem sich an der Oberfläche 

 eine Kahmhaut ausgebildet hatte, verhältnismäßig klar. Mikroskopisch zeigten sie im ganzen das Bild der 

 gewöhnlichen aus Erde gewonnenen Rohkulturen. Azotobacter war in allen Kulturen vorherrschend. Die 

 Zellen hatten das gewöhnliche Aussehen, färbten sich mit Jodjodkalium gelbbraun und führten einen 

 körnigen Inhalt. Ihre Größe war verschieden, die Diplokokken meistens beweglich, die Teilung ging 

 lebhaft vor sich. Außer Azotobacter fielen die stäbchenförmigen Bakterien am meisten auf, von denen 

 man nach der Größe 4 Arten unterscheiden konnte. Die eine zeigte sich mit Azotobacter stets ver- 

 gesellschaftet, war ziemlich kurz, dick und unbeweglich. Die granulosespeichernden Bakterien waren nicht 

 sehr zahlreich vorhanden, zahlreicher dagegen die trommelschlägerförmigen. Amöben und andere tierische 

 Organismen fehlten. 



Um den Stickstoffgehalt festzustellen, wurde die Erde auf den einzelnen Tellern gut vermischt, ein 

 Teil davon in flache Glasschalen gebracht und im Trockenschrank bei 100 "^ drei Stunden lang getrocknet. 

 8 g von jeder Probe wurden mit destilliertem Wasser ausgekocht, filtriert, und das Filtrat mit Diphenylamin- 

 Schwefelsäure auf Salpeter geprüft; es stellte sich heraus, daß dieser in keiner Probe vorhanden war. Dann 

 wurde der Stickstoffgehalt nach Kj eldahl- Wilf arth bestimmt in der Weise, daß jedesmal 8 g von einer 

 Probe zur Analyse verwandt wurden. Von jedem Teller wurden 3 Analysen gemacht. Aus den 3 Werten 

 wurde das Mittel genommen; so erhielt ich den durchschnittlichen Stickstoffgehalt in 8 g Erde. Hiervon 

 wurde, um die Zu- oder Abnahme an Stickstoff zu ermitteln, der mittlere Stickstoffgehalt in 8 g der 

 sterilen Erde auf Teller Nr. 4 abgezogen, der ebenfalls aus 3 Analysen berechnet war. Hieraus wurde die 

 Stickstoffzunahme in den 275 g Erde eines jeden Tellers berechnet. Wie aus Tabelle Nr. 6 ersichtlich, 

 hat auf allen 5 Tellern eine Zunahme des Stickstoffgehaltes stattgefunden, die größte in der Erde auf 

 Teller Nr. 6, nämlich 151 mg in 275 g Erde; dann folgte Nr. 2 mit 107 mg. Die Stickstoffzunahme in 

 der Erde auf den Tellern Nr. 1, 3 und 5 war ziemlich gleich, nämlich 80, 80 und 77 mg. 



Die Resultate dieser Versuchsreihe zeigen, daß die Stickstoffanreicherung im Boden unter den oben 

 angegebenen Bedingungen eine größere ist als in Nährlösungen. Schon ein Zusatz von 25 cbcm 3 pro- 



