5 R. Feitel, Beiträge zur Kenntniss denitrifizirender Meeresbakterien. 93 



2. Einfache Flüssigkeit: 

 2000 gr Muschelwasser, 

 30 gr Pepton, 

 5 gr Kaliumnitrit. 



In Reagirröhrchen wurden ungefähr je 20 — 25 ccm Nährlösung gefüllt und für die Impfungen 

 mit grösseren Volumina Seewasser einige Erlenmeyerkolben mit etwa 50 ccm der konzentrirten 

 Flüssigkeit beschickt. Die gefüllten Röhrchen wurden der fraktionirten Sterilisation im strömenden 

 Dampf unterworfen. Die Wasserproben wurden mit einem Fisch er 'sehen Wasserschöpfer 

 entnommen, der von Lautenschläger bezogen war. Um den Schöpfer steril zu erhalten, 

 bewahrte man ihn in Alkohol auf. Schlick wurde mit einem Schlammstecher vom Grunde 

 aufgeholt. Von dem aus der Tiefe geschöpften Wasser wurden geimpft: mit 1, 2 und 5 ccm 

 je 2 Röhrchen einfacher Bouillon, mit 10 und 20 ccm je 3 Gläschen konzentrirter Lösung und 

 ferner ein Erlenmeyerkolben mit 100 ccm. Die Impfung wurde mit sterilen Pipetten ausgeführt. 

 Schlick gelangte in erbsengrossen Portionen, die mit sterilem Spatel entnommen wurden, als 

 Impfmaterial zur Verwendung. 



Zu der Methode, die in Anwendung gekommen ist, habe ich folgendes zu bemerken. 

 Das Koch 'sehe Platten verfahren, mittelst dessen Fischer zur Feststellung der Zahl der im 

 Meerwasser auftretenden Keime so werthvolle Ergebnisse zeitigte, konnte deshalb nicht in 

 Anwendung kommen, weil es, von Bact. Actinopelte Baur und B. lobatum abgesehen, an 

 sicheren Kennzeichen mangelte, an denen man die denitrifizirenden Kolonien von den übrigen 

 unterscheiden konnte. Die von Baur angegebenen Merkmale, welche bei Anwendung einer 

 nitrithaltigen Gelatine auftreten sollen: Anhäufung von Karbonatkrystallen und Auftreten von 

 Gasblasen bei den gesuchten Kolonien, sind keineswegs allgemeine Eigenschaften derselben. 

 Es wäre daher, mit Rücksicht auf die verflüssigenden Kolonien, bereits an Bord des Dampfers eine 

 Ueberimpfung zahlreicher Einzelkolonien in Bouillonröhrchen nöthig geworden. Ferner gestattet 

 das Plattenverfahren nicht ohne grosse Umständlichkeiten die Impfung mit grösseren Wasser- 

 mengen. Nun schwankt aber die Zahl der in der Ostsee im Kubikcentimeter Wasser von 

 Fischer 2 gefundenen Keime zwischen 45 und 2000. Man hatte daher auch mit erheblichen 

 Schwankungen in der Häufigkeit der denitrifizirenden Bakterien zu rechnen. Deshalb wurde die 

 oben erwähnte, staffeiförmige Volumvergrösserung von 1 auf 2, 5, 10, 20 und 100 ccm des 

 Impfwassers angewendet. Man ging hierbei von der Voraussetzung aus, dass etwa vorhandene 

 denitrifizirende Bakterien in der Nitritbouillon sich energisch vermehren und das Nitrit unter 

 Aufschäumen zerlegen würden. Diese Voraussetzung traf indessen, wie ich weiter unten zeigen 

 werde, nicht immer zu. 



Am 20. Oktober wurden mir die von Herrn Dr. A pst ein an Bord der „Holsatia" angesetzten 

 Kulturen übergeben. In allen Röhrchen war die Bouillon durch Bakterienwachstum verändert 

 und mehrere zeigten Gasblasen. Die Kulturen wurden bei ca. 15° C. gehalten und zunächst 

 an jedem dritten Tag diejenigen notirt, welche schäumten. Die Prüfung auf Nitrit mittels 

 Diphenylaminschwefelsäure nahm ich erst vor, als bei den schäumenden Röhrchen augenscheinlich 

 die Denitrifikation beendet war. Bei dieser ersten Untersuchung waren die ältesten Kulturen 



