Tome V, 1901. 



354 JEAN MASSART. SUR LE PROTOPLASME 



plus clairement lorsqu'elles sont restées une heure à peine dans la 

 solution à •i/jo ooo- ^^ réussite est fort difficile avec les Gloeocapsa, les 

 Gloeothece, les Aphanothece et les autres Chroococcacées dont les cellules 

 sont entourées d'une couche gélatineuse dense, dans laquelle la matière 

 colorante est arrêtée. 



Le seul reproche que l'on puisse faire à la méthode, c'est qu'il est 

 impossible de conserver les préparations dans cet état. Par aucun moyen, 

 je ne suis parvenu à fixer le bleu de méthylène dans la cellule : j'ai 

 essayé en vain le tannin, le molybdate d'ammonium, le chlorure mercu- 

 rique, l'alun, le chromate jaune de potassium, le bichromate de potas- 

 sium... ; toujours, après quelques jours de conservation dans la glycérine, 

 la matière colorante avait diffusé dans toute la cellule. Le résultat est 

 un peu meilleur quand on prend, au lieu de glycérine, du formol à '•/^o; 

 mais au bout d'une quinzaine de jours, les préparations sont également 

 perdues. Le seul moyen pratique consiste à traiter les cellules, colorées 

 au bleu de méthylène, par une solution aqueuse de picrate d'ammonium 

 à ^1^200- On laisse agir une demi-heure au moins; après lavage par l'eau, 

 on monte au formol à "i/oQ. De telles préparations se conservent fort 

 bien; malheureusement, la teinte violette, prise par le corps central, est 

 loin d'être aussi favorable que la couleur bleue primitive. 



Le montage au baume permet de conserver assez bien la coloration 

 du corps central; mais dans ce milieu trop réfringent beaucoup de 

 détails disparaissent. 



On obtient aussi de bonnes colorations en employant, non pas la 

 solution diluée de bleu de méthylène neutre, mais une solution beau- 

 coup plus concentrée de bleu de méthylène alcalin (bleu de méthylène 

 polychrome). J'ai utilisé directement la solution telle que la fournit 

 M. Grùbler (à Leipzig). Après lavage à l'eau, on passe les cellules dans 

 une solution aqueuse à '/200 de chromate jaune de potassium. Enfin, on 

 monte au formol à ^/^q. Toute la série des opérations est terminée en 

 une heure au plus. 



Je n'ai pas besoin d'ajouter que j'ai aussi employé les méthodes 

 ordinaires de fixation et de coloration, notamment la fixation à l'alcool, 

 au sublimé, à l'acide chromique, à l'acide osmique, à l'acide picrique, etc., 

 et la coloration par les divers carmins et hématoxylines, et par le vert 

 de méthyle acétique. Lorsque je comparais ensuite les résultats obtenus 

 par ces moyens avec ceux que me donnait l'emploi de bleu de méthylène 

 in vivo, je revenais toujours à ce dernier procédé. 



