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Milchsäure entspricht, wurde in die Berechnung dieser Versuche 

 aus anderen Versuchen eingesetzt, die gleichzeitig an gleichartigen 

 Fröschen ausgeführt wurden. 



Für die Milchsäurebestimmungen benutzte ich eine Mikro- 

 methode, welche eine Übertragung der bekannten Methode von 

 Fürth und Charnass ins Kleine darstellt. Für die Bestimmung 

 genügt 1 g Mu-;kelgeweb8 : der gefrorene Muskel wird nach Fletcher 

 und Hopkins in stark gekühltem Alkohol zerrieben, sorgfältig aus- 

 gelaugt, durch Wassei-zusatz auf 607o gebracht, dann über Glaswolle 

 filtriert, ausgewaschen, der Auszug genau neutralisiert und verdampft. 

 Der Verdampfung-jrückstand wird mit wenig Wasser avifgenommen, 

 mit festem Ammonsulfat gesättigt und durch Zusatz von gesättigter 

 Ammonsulfatlösung auf 10 cm^ gebraciit, durch ein winziges Asbest- 

 filter unter geringem Überdrück in einen doppelten Schütteltrichter 

 filtriert und zehnmal mit je 10 cm^ Äther ausgeschüttelt^). Der Aus- 

 zug wird an einer Dreikugelnkolonne verdampft, mit Wasser aufge- 

 nommen, mit Kalkkarbonat neutralisiert, filtriert, verdampft, mit 

 30 cm^ einer 0-'2o^lQigen Schwefelsäure, welcher etwas Talcum bei- 

 gemischt ist, aufgenommen und in einen Claisenschen Kolben von 

 100 cm^ Inhalt gespült, dessen absteigendes Ablaufrohr sehr lang, 

 senkrecht nacii unten gebogen und mit einem kurzen Kühler ver- 

 sehen ist. Die Milchsäurelösung wird nun zum Kochen gebracht 

 und durch Viooo n-Kaliumpermanganatlösung, die aus einem graduierten 

 Tropf Zylinder, dem geraden Hals des Kolbens aufgesetzt, tropfen- 

 weise lierausfließt, oxydiert. Das Tempo des Zufließens wird so 

 gehalten, daß das Volumen der Flüssigkeit im Kolben gleich 

 bleibt. Wenn das einfließende Permanganat nicht mehr entfärbt 

 wird, sondern das suspendierte Talcum bräunlich zu färben be- 

 ginnt, läßt man noch 10 cm^ zutropfen uml imterbricht dann die 

 Destillation. 



Das Destillat wird in einer \'olhardschen Vorlage in Vioo ^^" 

 Kaliumbisulfit und 5 cm^ Wasser aufgefangen; die Vorlage befindet 

 sich in Eis. Man setzt bei Beginn des Versuches ein zweites Gefäß in 

 Eis. in welchem die gleiche Menge Bisulf it sich befindet. Nach Unter- 

 brechung der Destillation fügt man zu dieser Probe soviel Wasser, 

 als man in dem Hauptversuch in die Vorlage hineindestilliert hat: 

 man kennt diese Menge aus der Menge des verbrauchten Perman- 

 gana ts. 



Nach einer Viertelstunde titri^u't man das Bisulfit in beiden 

 Gefäßen mit ^^^o Jodlösung aus einer Bangschen Mikrobürette ; 

 die Differenz ergibt die Aldehydmenge im Destillat. Einem Kubik- 

 zentimeter VjoQ Jodlösung entspricht 0-9 mg Milclisäure. 



^) Durch Sättigung mit Amousulfal werden emulgiertc Fette, 

 Seifen vsw. vollständig entfernt. Das Verfahren ersetzt die Tit;rkohIe- 

 behaudlung (nach Fletcher und Hopkins) vollständig und ist schneller 

 und vollständiger und bef[uemer. Ich bin'darauf durch E. J. Lessei' 

 aufmerksam gemacht worden, der das Amon-^ulfatverfahren bei dt'n 

 gewöhnlichen >,Iilchsäuret»estimmuns'en anwaiul le. 



