GERMINATION DES SPORES DES LEVURES 339 
d'autant plus que la différenciation du noyau des levures, étant très 
délicate, peut prêter à des erreurs. En effet, les fusions qui sont 
presque générales entre les spores du S. Ludwigit n'étaient signa- 
lées qu’à l’état d'exception dans les autres levures ; mais l'argument 
le plus sérieux contre notre manière de voir était le fait constaté 
par Lepeschkin de la fusion des spores chez le Sch. mellacei, dans 
lequel nous avions nous-mêmes décrit une conjugaison au moment 
de la formation de l’asque : il paraît inadmissible qu'il puisse 
exister deux fécondations dans l’évolution d’un même organisme. 
Ces considérations nous ont donc amené à entreprendre de nou- 
velles recherches sur la germination des spores des levures, dans 
le but d'essayer d’éclaircir cette question. 
II. TECHNIQUE 
Nous avons fait sporuler sur tranche de carotte les levures que 
nous voulions étudier. Il existe toujours dans les cultures un 
nombre plus ou moins considérable de cellules qui sont deve- 
nues asporogènes : on peut augmenter très sensiblement le nombre 
des cellules sporogènes en employant les méthodes indiquées par 
Beyerinck et Hansen. On extrait, à l’aide d’un fil de platine, une 
masse de levure développée sur une tranche de carotte et ayant 
formé des spores, puis, on l’étale sur une lame que l’on place 
pendant vingt-quatre heures dans une étuve chauffée entre 55° 
et 60°. Les cellules n'ayant pas sporulé sont tuées à cette tempé- 
rature et seules les spores résistent, Cette opération terminée, on 
humecte le contenu de la lame avec de l’eau et on le transporte à 
l’aide d’un fil de platine sur un tube à tranche de carotte stérilisé ; 
on obtient ainsi une culture très sporogène, issue seulement des 
Spores de la culture précédente. 
Pour suivre la fusion des spores en cultures sur cellules 
Van Tieghem, nous nous sommes servis, comme milieu de cultures, 
de jus de raisin à 8 °/, de gélatine. 
Pour les études cytologiques, nous avons presque toujours fait 
germer les spores sur tranches de carotte. Les cellules extraites en 
grande abondance, à l’aide d’un fil de platine, d’une culture dont 
les cellules ont formé leurs spores, sont ensuite placées sur une 
