340 : REVUE GÉNÉRALE DE BOTANIQUE 
tranche de carotte stérilisée, puis laissées à l’étuve à 25° pendant 
un temps qui varie avec l’espèce de la levure et le stade de germi- 
nation que l’on veut étudier. Malgré l'emploi de la méthode précé- 
demment indiquée, il reste toujours dans les cultures un certain 
nombre de cellules ne sporulant pas : celles-ci se développent avant 
les spores et empêchent souvent de retrouver les stades de germi- 
nation de ces dernières; il y a donc avantage à étaler de nouveau 
les levures sporulées sur une lame que l’on chauffe pendant vingt- 
quatre heures à 55° ou 60°, avant de les faire germer sur tranche 
de, carotte, de façon à tuer les cellules végétatives. Nous nous 
sommes assurés préalablement que ce traitement ne déterminait 
aucune variation dans le mode de germination des spores. Ce 
procédé a surtout l’avantage, comme nous le verrons plus loin, de 
permettre d'étudier d’une façon très précise la germination des 
spores de la levure de Johannisberg, qui sans cela pourrait prèter 
à certaines erreurs. I} a cependant l'inconvénient de donner des 
préparations moins belles où les spores sont parsemées de cellules 
végétatives désorganisées et mal colorées. 
Afin de chercher à éviter toutes causes d’erreurs dans une ques- 
tion aussi délicate, nous avons perfectionné autant que possible la 
technique histologique que nous avions employée dans nos précé- 
dentes recherches (2). Au lieu de continuer, pour les fixations, 
l’usage de l’acide picrique ou de l'alcool; nous avons reconnu que 
le picroformol (Bouin) donnait des résultats bien supérieurs ; aussi 
la plupart de nos fixations ont été faites à l’aide de ce procédé. La 
fixation dure douze heures, après quoi, on lave à l’alcool à 70°, 
renouvelé jusqu’à ce qu'il ne jaunisse plus par l'acide picrique ; ce 
lavage doit être effectué avec le plus grand soin. Un autre procédé 
qui donne présque toujours de très bons résultats est le liquide de 
Péreniy (1}; on laisse agir le fixateur pendant 42 heures, puis on 
lave à l'alcool à 70°, Le liquide de Flemming peut être employé 
aussi, à condition toutefois de décolorer les cellules par le per”. 
oxyde d'hydrogène suivant la méthode d’Overton ; ce procédé est 
généralement inférieur aux précédents ; la pénétration ne se fait 
{) Acide chromique à 0,5 p. 100, 3 parties. 
Acide nitrique à 10 p. 100,, 4.  — : 
SR à 
— 
