Avant tout, les auteurs ont cherché à s'affranchir des milieux de culture 
qui, comme le bouillon, n'offrent pas la garantie d’une composition con- 
stante et homogène. Après de nombreux essais ils se sont arrêtés au 
liquide suivant : 
Phosphate bibasique de soude. . . . . . . O gr. 97 
Phosphate monobasique de potassium. . . . O gr. 14 
Chiorure de cale 2e 7 LATE © 2. O gr. 04 
Chlasure de botassinnt 2 nn. ne à O gr. 30 
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Cette dissolution de sels additionnée de 1 p. 100 de peptone Witte et 
neutralisée se montra être un excellent milieu de culture pour les douze 
espèces étudiées. Les auteurs varièrent alors les proportions de ces sels, 
remplacèrent la peptone par de l’asparagine, puis par du sulfate d'ammo- 
nium, toujours dans l'espoir qu'une modification du milieu permettrait 
de différencier l’une ou l’autre des espèces. Il n’en fut rien et aucunes 
différences réelles ne purent être trouvées, à ce point de vue, entre les 
diverses espèces du groupe. 
Les auteurs changèrent alors de procédé et cherchèrent à déterminer 
si les espèces étudiées se distinguent par les produits de culture qu'elles 
élaborent dans le liquide nutritif choisi. Ils étudièrent d’abord la forma- 
tion d'hydrogène sulfuré; ils en constatèrent la présence dans les cultures, 
mais sa production plus ou moins accentuée dépend du degré de vitalité 
des cultures et ne constitue pas une différence assez fondamentale pour 
pouvoir, par cela, différencier les espèces. 
Ils recherchèrent alors la présence de phénols, mais sans succès. 
Avec l'indol ils furent plus heureux, dans ce sens qu'ils arrivèrent à 
constater que seules les trois cultures de Klein (fowl-cholera, fowl-enterite 
et swine-fever) n’en produisent pas. 
Ils recherchèrent alors si ces bactéries font fermenter les sucres. Dans 
les cultures de peptone ces bactéries ne produisent jamais de gaz, si donc 
l'addition d'un sucre donne lieu à une production gazeuse, il est certain 
que la fermentation est due à la décomposition de l'hydrate de carbone 
ajouté. Ils ajoutèrent donc à leur liquide de culture les sucres suivants à 
la dose de 1 p. 100 : sucre de raisins, mannite, lévulose, sucre de canne, 
sucre de lait, maltose, raffinose, dextrine, fécule de pomme de terre, gly- 
cérine, adonite, dulcite. 
Les résultats furent très intéressants. Le bacille de la peste porcine fit 
fermenter tous les sucres, et produisit de fortes quantités de gaz. La plus 
grande partie de ce gaz est absorbée par la solution de soude caustique; 
c'est donc de l'acide carbonique; il reste cependant une partie qui brüle 
en faisant explosion; on peut par conséquent admettre que ce reste est de 
l'hydrogène. Lorsqu'on abandonne le tube après l’adjonction de la soude 
caustique pendant 24 heures à la température de la chambre, le liquide de 
culture et surtout la partie exposée à l'air prennent une belle coloration 
rouge fluorescente, rappelant l’éosine. Cette matière colorante n’est pas due 
à l’action de l’alcali sur le sucre et devient brunâtre dans la suite, mais 
