ne sont pas mobiles et ne se colorent pas d'après la méthode de 

 Gram. Souvent les pôles prennent mieux la couleur que le milieu. 

 La culture de ces microorganismes causa les plus grandes 

 difficultés à M. Pfeifïer. Sur plaques de gélatine ou d'agar, ils se 

 refusèrent absolument à croître. Par contre, en inoculant le spu- 

 tum ou le pus provenant du poumon directement sur de l'agar, 

 l'auteur vit parfois croître de fines petites colonies, claires comme 

 de l'eau et composées de ce bacille. Mais là s'arrêta la crois- 

 sance. Toutes les inoculations subséquentes de ces colonies sur 

 agar, sérum ou autres milieux restèrent sans résultat. Aucunes 

 cultures ne s'obtenaient non plus en première génération quand, 

 au lieu d'inoculer le sputum non dilué, on le diluait d'abord dans 

 de l'eau ou dans du bouillon, ou quand le sputum avait été 

 lavé d'après la méthode de M. Kitasato dans de l'eau stérile. 

 M. Pfeiffer en tira la conclusion que les premières inocula- 

 tions ne prenaient que parce que la matière ensemencée contenait 

 certaines substances propres à nourrir les bacilles et il chercha 

 alors longtemps un milieu nutrilifqui contîntces substances. Après 

 de longues recherches, il découvrit qu'en étalant quelques gouttes 

 de sang stérile sur de l'agar, ce dernier devenait un milieu émi- 

 nemment propice pour cultiver ce bacille. On peut ainsi le cultiver 

 de génération en génération. Dès qu'on supprime le sang, toute 

 croissance cesse. Des recherches ultérieures montrèrent que c'est 

 l'hémoglobine qui contient les principes nécessaires à l'existence 

 de ce curieux microbe. M. Pfeifl'er avait d'abord employé du sang 

 humain. Il constata plus tard qu"on peut également se servir du 

 sang de lapins, de cobayes, de pigeons et même de poissons. 



M. Pfeifl'er procède maintenant ainsi. Il commence par diluer le 

 sputum et l'ensemence en partie sur agar recouvert de sang, en 

 partie sur agar ordinaire. Ce dernier doit rester stérile ou ne con- 

 tenir que des contaminations fortuites, et seuls les tubes préparés 

 avec du sang donnent des cultures du bacille. Après 24 heures 

 passées à Tétuve, celles-ci se voient sous forme de gouttelettes rap- 

 prochées et claires comme de l'eau. Quand il y a beaucoup de colo- 

 nies, elles restent généralement petites; quand elles sont moins 

 nombreuses, elles peuvent atteindre la grosseur d'une tète d'épingle, 

 mais restent toujours transparentes. Les bacilles croissent bien 

 aussi dans du bouillon contenant du sang. Ils sont absolument 

 aérobies. Ils ne croissent pas au-dessous de 26° à 27", ni au-dessus 

 de 42°. Dans l'eau ces bacilles périssent rapidement; au bout de 

 8 heures de séjour dans ce liquide, déjà, ils ne donnent plus de cul- 

 tures quand on les reporte sur agar au sang. Les cultures dans le 

 bouillon et sur agar restent vivantes pendant 14-18 jours. Los 

 bacilles sont très sensibles à la dessiccation. Desséchés à l'étuve, ils 

 meurent en 1 à 2 heures. A la température de la chambre et 

 dans l'air assez humide du laboratoire, ils ne meurent qu'après 



