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En moyenne, un diagnostic microscopique certain pourrait être 

 fait ainsi dans oO p. 100 des cas. 



Cultures dari s des solutions depeptone et cultures sur plaques de gé- 

 latine. — A côté de l'examen microscopiqueon doit toujours recourir 

 aux procédés de culture pour établir avec une certitude absolue 

 la présence du bacille virgule. Pour faciliter sa recherche, on ense- 

 mence quelques tlocons muqueux ou quelques gouttes des déjec- 

 tions dans une solution de peptone très alcaline à 1 p. 100 et 

 additionnée de chlorure de sodium à 1 p. 100. 



Dans ce milieu les bactéries du choléra augmentent rapidement 

 de nombre à 37" et se tiennent, étant très aérobies, à la surface. Au 

 bout de 6 à 12 heures, quand l'examen d'une goutte prise à la sur- 

 face montre des bacilles virgules, on fait des cultures sur plaques 

 de gélatine avec le liquide de la surface (les 3 dilutions habituelles). 

 L'augmentation du nombre des bacilles cholériques permet ainsi de 

 déceler leur présence même dans les cas où les plaques ensemen- 

 cées directement avec les déjections en contiendraient si peu que 

 leur constatation ne réussirait pas. La gélatine doit également être 

 alcaline, ei les plaques tenues à 22° environ, c'est-à-dire à la tem- 

 pérature la plus élevée que supporte la gélatine à 10 p. 100 sans 

 se liquéfier, afin de hâter le développement des colonies. 



En même temps que l'on fait les cultures de peptone, on fait, 

 dans tous les cas. des cultures sur plaques de gélatine avec les dé- 

 jections originales. Souvent, b's colonies caractéristiques apparais- 

 sent sur ces premières plaques en 15-20 heures. Le diagnostic est 

 alors d'autant plus rapide. Si celles-ci ne donnent pas de colonies, 

 on a la ressource des plaques faites avec la solution de peptone 

 ensemencée, que l'on examine de 6 à 12 heures plus tard (temps 

 d'incubation de la solution du peptone). Dans ce cas, le diagnostic 

 peut donc être posé dans un dt'lai encore très court, généralement 

 en 26 heures. Nous ne rappelons pas ici l'aspect des colonies cho- 

 lériques sur gélatine, si connu de tous les bactériologistes. Un 

 développement atypique est très rare; dans ce cas, les autres moyens 

 d'investigation permettent de lever les doutes. 



Cultures sur plaques d'agar. — Sur agar, les colonies du bacille 

 virgule sont moins caractéristiques. Cependant, un œil exercé peut 

 les distinguer assez sûrement. A la surface de l'agar, ils forment 

 des colonies de dimensions moyennes, transparentes et d'une cou- 

 leur gris brimàtre clair particulière. L'avantage des cultures sur 

 agar est de fournir, grâce à la température de 37" à laquelle on 

 peut les tenir, des colonies cholériques déjà après 8 à 10 heures. 

 Ces colonies n'étant caractéristiques qu'à la surface, il faut verser 

 l'agar liquéfié dans des boîtes de Pétri, et ne l'ensemencer qu'après 

 solidification, en frottant la surface avec l'anse de plqtine. L'agar 

 ayant une tendance, en se solidifiant, à se recouvrir d'une fine 

 couche de liquide gênant pour le développement de colonies isolées, 



