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observations de Cramer, nous avons choisi l'agar comme 

 terrain de culture, modo de faire qui, en outre d'aulres 

 avantages, permet de recueillir les cellules des bactéries 

 à l'exclusion, autant qu'il est possible de le faire, de 

 leurs produits. 



Dans des tubes hauts de 20 centimètres et d'un diamètre 

 de 4 1/2 centimètres, stérilisés et fermés à la ouate, nous 

 versions 30 centimètres d'agar nutritif. Celui-ci était pré- 

 paré avec du bouillon de viande, additionné de 1 p. 100 de 

 peptone, de 0,5 p. 100 de chlorure de sodium, de 2 p. 100 

 d'agar et de 0,3 p. 100 de carbonate de soude, ce dernier 

 étant ajouté après neutralisation. Après les avoir remplis 

 d'agar on stérilisait les tubes 3 jours de suite et on lais- 

 sait l'agar se consolider en surface inclinée, après quoi ils 

 étaient tenus pendant 48 heures à l'étuve à 37" pour enle- 

 ver toute l'eau de condensation. On ensemençait ensuite 

 pour chaque série et pour chaque bacille 3 tubes avec 

 3 gouttes de bouillon de culture de 48 heures, en opérant 

 de façon à humecter toute la surface de l'agar. Les tubes 

 placés horizontalement étaient maintenus durant 48 heures à 

 la température de 28° à 30". A ce moment, la végétation 

 était telle que la culture recouvrait toute la surface de 

 l'agar. Après avoir constaté sa pureté au moyen de prépa- 

 rations microscopiques, la végétation de chaque bacille 

 dans les trois tubes était portée au moyen d'une aiguille de 

 platine dans une très petite capsule de platine, en ayant 

 toujours très soin de n'enlever aucune parcelle d'agar, ce 

 dont nous avons pu nous convaincre par l'aspect de la sur- 

 face dénudée de l'agar qui ne présentait pas la moindre 

 solution de continuité. Les capsules qui avaient d'abord été 

 tarées étaient, de suite après la récolte des cultures, 

 maintenues à 100" dans l'étuve à eau pendant 4 heures et 

 ensuite pendant 18 heures dans un exsiccateur. De la sorte 

 la dessiccation des cultures était complète. Les capsules 

 étaient alors pesées entre deux verres de montre pour 

 déterminer la quantité de substance. Après cela on procé- 

 dait à la détermination de l'azote d'après la méthode de 

 Kjehldal avec la modification de Gunning, méthode qui 

 nous a toujours donné des résultats parfaitement exacts, 

 comme nous avons pu nous en convaincre en l'employant 



