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 CHAPITRE V 



TECHNIQUE DES EXPERIENCES Ùl vitVO 



Nous avons eu recours à la méthode recommandée par 

 de Freudenreich (1), largement mise à contribution depuis 

 par Worongolf, Winogradoff, Kollesnikoff, Spirig, etc. 



Cette méthode est préférable à l'emploi des fils de soie 

 qui, de l'avis de plusieurs bactériologistes, ont l'inconvé- 

 nient de trop fixer les bactéries. Les morceaux de papier 

 à filtrer Berzelius, mathématiquement coupés au tire-ligne 

 et d'une surface de 1 centimètre carré, sont mis à tremper 

 pendant 10 minutes dans une émulsion faite avec une cul- 

 ture sur agar de l'organisme soumis à l'étude. L'émulsion 

 qui est faite avec 10 centimètres cubes d'eau stérilisée 

 doit être trouble et sans parcelles flottantes. Après 1-0 mi- 

 nutes, on commence par réserver deux papiers témoins 

 pour les contrôles de 5 minutes et de 21 heures; puis, en 

 procédant à heures et minutes strictement observées, les 

 autres papiers sont introduits dans les solutions titrées, 

 après les avoir retirés de l'émulsion avec une double pin- 

 cette stérilisée, en enlevant l'excédent d'eau que peut 

 renfermer le papier. 



Ceci fait, on retire de chaque godet réservé à chaque 

 solution titrée le morceau de papier qui est mis pendant 

 5 minutes dans 10 centimètres cubes d'eau stérilisée, puis 

 introduit dans le tube Petrusehky renfermant 10 centimètres 

 cubes de gélatine préalablement liquéfiée ; le Petrusehky 

 est agité une vingtaine de fois, puis posé à plat et bien 

 étiqueté pendant la durée de l'observation et à l'abri de la 

 lumière. 



Au bout d'un, deux, trois, quatre, cinq et six jours, on 

 détermine le nombre des colonies. Le développement des 

 colonies doit toujours se faire à une température jamais 

 inférieure à 15 et 17 degrés. 



(1) de Freudenreich, Annales de Micrographie, III, p. 101. 



