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Weiter unten werden wir noch mehrere Serien sehen, in welchen alle 

 Kulturen gleichzeitig titrirt worden sind und die Verschiedenheiten dadurch 

 viel deutlicher hervortreten. 



Wie aus oben angefülirteui hervorgeht, ist es für diese Arbeit nothwen- 

 dig gewesen, dass die Proben für Titrirung und ïhierversuche aus einer und 

 derselben Kultur genommen worden sind. Es ist jedoch nicht leicht, mehrere 

 Mal Proben aus einer Bouillonzüchtung zu nehmen ohne dieselbe zu inficiren. 

 Deshalb haben wir nicht gewöhnliche Kulturkolben, welche auch die Verdun- 

 stung sehr erleichtern, gebraucht, sondern sind die Kulturen in grösseren (1 — 

 1\2 Liter) Retorten mit langem, schmalen Halse und einem Tubulus der von 

 einem gläsernen Pfropfe verschlossen wird, angelegt worden. Der Hals ist 

 immer mit Watte geschlossen gewesen, und die Proben hat man durch den 

 Tubulus, welcher sich sehr leicht (durch Brennen, Alkohol, Aether etc.) steri- 

 lisiren lässt, herausgeholt. Dadurch ist es mir beinahe immer gelungen, meh- 

 rere Mal Proben aus einer und derselben Kultur zu nehmen, ohne dieselbe zu 

 inficiren. Die Kulturen sind in den Retorten sehr reichlich gewachsen, — 

 also scheint ihr Wachsthum dui'ch dieselben nicht gelitten zu haben. Jede 

 Retorte enthält 800 cm^ Näkrbouillon. 



Nach sorgfältiger Sterilisirung der Nährflüssigkeit in den Retorten, hat 

 man dieselbe vermittelst einer Oese aus einer 24 Stunden alten Bouillonkultur 

 des resp. Bacillus inöcirt. Die Kulturen sind danach im Thermostat bei 35 

 —37° C. die ganze Zeit gewachsen, nnd nur bei Abnehmen der Proben aus 

 dem Thermostat herausgenommen worden. Das Nährmedium ist immer ge- 

 wöhnliche Bouillon gewesen: 500: 1000, 1% Pepton, 0,5% Kochsalz. 



II. Bestimmung der Reaktion. 



Die quantitative Bestimmung des Alcalescenz-resp. Säuregrades ist durch 

 Titrirung mit Vio Normalschwefelsäure und 1,0 Normalnatronlauge vorgenom- 

 men worden. Als Indikator wurde Rosolsäure in heisser, wässeriger Lösung, 

 die unmittelbar vor jeder Titrirung von Neuem bereitet wurde, gebraucht. 

 Mehrere Mal habe ich aber auch andere Indikatoren, Phenolphtalein und 

 Lackmustinctur, versucht. Der beste von den genannten Indikatoren ist die 

 Rosolsäure; Phenolphtalein giebt keine genauen Resultate, und auch Lackmus- 

 tinctur kann der Rosolsäure nicht gleichgestellt werden. 



Doch sind mit dem Besitze eines ziemlich empfindlichen Indikators die 

 sich bietenden Schwierigkeiten keineswegs überwunden. Die Titrirung der 



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