CQÖ Hans Kniep, 



Schicht ZU vermeiden, darf man sie nicht zu dick auftragen 

 (vergl, Ra witscher, 1912); unter Umständen ist es zweck- 

 mäßig, den Objektträger vorher mit einer ganz dünnen Schicht 

 Hühnereiweiß zu bestreichen, das koaguHert wird (vergl. Nichols, 

 1904, S. 34). Für das Studium etwas älterer Keimungsstadien 

 ist die Methode nicht zu empfehlen. Sobald nämlich die jungen 

 Mycelien in den Agar eindringen, werden die Färbungen zu 

 ungleichmäßig, und dadurch wird die Untersuchung sehr er- 

 schwert. Dann führen zwei andere Wege besser zum Ziele. 

 Einmal Mikrotomschnitte, mit denen man, selbst wenn sie 25 /* 

 dick sind, noch sehr schöne, gleichmäßige Färbungen erhalten 

 kann. Ich ging dabei ebenfalls von Agarkulturen aus. Der 

 Agar wurde in Petrischalen ausgegossen. Nach der Sterilisation 

 wurde dann an der Innenseite des Deckels ein Stück des 

 Hymeniums angeklebt. Dabei ist, um Infektion zu verhüten, 

 die Schale umzukehren, so daß Außenseite des Deckels und 

 Oberfläche der Agarschicht nach unten gewandt sind. Zu 

 achten ist auch darauf, daß die Oberfläche des Agars nicht mit 

 Wasser bedeckt ist, welches beim Umkehren der Schale auf 

 den Deckel gelangt und nachher wieder zurückfließen kann. 

 Das Hymenium enthält natürlich immer zahlreiche Keime, die 

 so auf den Agar gelangen könnten. 



Sind genügend Sporen ausgestreut, so ist die Schale um- 

 gekehrt aufzustellen und das Hymenium tunlichst zu entfernen. 

 Bei Beachtung dieser, für den Bakteriologen kaum erwähnens- 

 werten Vorsichtsmaßregeln erhält man leicht Reinkulturen des 

 Pilzes. Sind die gewünschten Entwicklungsstadien erreicht, so 

 wird der Agar in Würfel geschnitten und fixiert. 



Zur Fixation verwandte ich mit bestem Erfolge das schwächere 

 Flemmingsche Gemisch. Um das Eindringen der Flüssigkeit 

 in die Würfel zu beschleunigen, ist es zweckmäßig, vorsichtig 

 zu schütteln. Ich fixierte nur selten länger als 20 Minuten. 

 Schwärzungen traten in dieser kurzen Zeit nicht auf. Die Ein- 

 bettung in Paraffin geschah unter Vermeidung von Xylol durch 

 Vermittlung von eingedicktem Zedernholzöl nach der Vorschrift 

 von Ruhland (1901). Die Methode hat den Vorzug, daß das 

 Einbetten sehr schnell geht, und daß man die Objekte nur kurze 

 Zeit der hohen Temperatur des Thermostaten auszusetzen braucht. 



