Über Ustilago Longissima und ihre Varietät Macrospora. 2SS 



ein sicheres Umstechen zentral eingestellter Objekte. Die Winkelpipette ist ein fein 

 aiisgezogenes Glasrohr, dessen verengter Teil gegen das Rohr um einen Winkel von 

 ca. 45 Grad abgebogen ist. Der kapillare Teil erhält in einer Entfernung von 

 2 — 3 mm von der Öffnung ebenfalls eine leichte Abbiegung, so daß aus der Kapillar- 

 offnung austretende Wassertropfchen sich an dem Winkelknie ansammeln und von 

 hier durch eine leichte Beiührung auf das > Operationsfeld« übertragen werden können, 

 ohne daß durch Kapillarwirkung der Tropfen wieder zumckgesaugt würde. Ein in 

 das Glasrohr eingeschobener Wattebausch verhindert das Eindringen von Mundkeimen 

 beim Ausblasen der Pipette. Glasröhrchen und Glasstäbchen werden in größerer 

 Menge und verschiedener Stärke hergestellt und sterilisiert in Petrischalen vorrätig 

 gehalten. Die Versuche gestalten sich dann folgendermaßen: 



1. Verteilen einer dünnen Brandsporenaufschwemmung mit Glasspatel auf Würze- 

 agarplatten. Das günstigste Stadium für die Versuche an der Longissima ist das 

 Zwei- bis Dreisporidienstadium. Die eiste Sporidie ist dann bereits zu einem kleinen 

 Fruchtträger herangewachsen, die zweite hat sich stark gestreckt, die dritte ist soeben 

 abgeschnürt. Die Reihenfolge ihrer Entwicklung läßt sich so leicht ablesen. 



2. Einstellen isoliert liegender gekeimter Sporen bei schwacher Vergrößerung 

 (Zeiß A, Okular 2) in die Mitte des Gesichtsfeldes, Umstechen mit dem Platin- 

 stecher durch Senken des Mikroskoptubus. 



3. Abpräparieren der Agarmasse um den ausgestochenen Agarkreis mit Lanzett- 

 nadel. Die Spore liegt dann auf der Oberfläche eines isolierten Agarzj'linders, dem 

 » Operationsfeld < . 



4. Kontrolle des Operationsfeldes bei mittlerer Vergrößerung (Zeiß D, Komp.- 

 Okular 6) auf etwaige Fremdsporen oder Frenidsporidien. Skizzieren des Keimungs- 

 bildes, um spätere Irrtümer bei der Bezeichnung der Reihenfolge der Sporidien zu 

 vermeiden. 



5. Übertragen eines Wassertröpfchens mit der Winkelpipette auf das Feld und 

 Abpräparieren der ersten Sporidie von der Agaroberfläche bei schwacher Vergrößerung 

 mit Glasstäbchen. Die Sporidie muß frei in der Flüssigkeit schwimmen. 



6. Abfischen der Sporidie durch Einsaugen in Kapillarröhrchen. Kontrolle, 

 daß Spore und andere Sporidien nicht mit fortgerissen ! 



7. Ausblasen der Kapillare auf Deckgläschen, das über hohlgeschliffenem Objekt- 

 träger zu feuchter Kammer verarbeitet wird. 



8. Kontrolle des Deckglaströpfchens auf Vorhandensein der gewünschten Sporidie 

 bzw. Fehlen von Fremdsporidien. 



In gleicher Weise weiden die weiteren Sporidien imd schließlich die Brandspore 

 abgefischt und isoliert. Über jede Brandspore wird genauestes Protokoll geführt. 

 Nach einigen Tagen werden die inzwischen herangewachsenen Kolonien vom Deck- 

 gläschen mit keilförmig zugeschnittenen Filtrierpapierstückchen abgesaugt und in 

 Schrägagarröhrchen, die mit einigen Tropfen Würze beschickt sind, überimpft. Von 

 dort aus werden die Kulturen durch Kombination mit Teststämmen auf ihr Geschlecht 

 geprüft. Sporidien, die nicht eingeschlechtig sind, lassen dies bereits in den Deck- 

 glaskulturen durch Auftreten von Kopulationen und Suchfäden erkennen. Es ist 

 selbstverständlich, daß alle Manipulationen unter Einhaltung möglichster Asepsis 

 (Sterilisierung aller benötigten Instnmiente, Desinfektion des Mikroskoptisches und 

 der Objektive durch vorsichtiges Abreiben mit Alkohol, Desinfektion des Arbeits- 



