Vererbtingspliysiologische Unter siuhungen an Arten von J't-nüillium itsic. 2 "Kl 



Schale nach dem Erstarren ausgegossen. Durch Kippen der geschlossenen 

 Schale verteilt sich das sporenhaltige Wasser gleichmäßig auf dem Agar. 

 Darauf läßt man keimen, 12 bis 24 Stunden, je nachdem, ob man es mit Asper- 

 gillen oder mit Penicillien zu tun hat. Man erhält dann die einzelnen gekeimten 

 Konidien in genügend weitem Abstände voneinander, so daß man sie bequem 

 ausstechen kann, ohne Gefahr zu laufen, mehrere zugleich zu fassen. Dazu 

 nimmt man die Schale aus dem Impfkasten — ich verschließe sie vorsichtshalber 

 immer mit einem Kautschukband — , stellt unter dem Mikroskop schnell fest, 

 wo isolierte Zellen gekeimt sind, und hebt, wieder im Impfkasten, die betreffende 

 Stelle, die man sich mit dem ölstift markieren kann, mit dem sterilen Messer 

 ab und überträgt in die gewünschte Nährlösung. Bei Anwendung einer genügend 

 dünnen Agarschicht und entsprechend niedrigen Schalen brauchen diese außer- 

 halb des Impfkastens gar nicht geöffnet zu werden. Bei der Größe der in Be- 

 tracht kommenden Sporen ist diese Methode die einfachste. Allerdings ist es 

 unvermeidlich, daß hierbei eine geringe Menge Agar mit übertragen wird. Das 

 hat sich aber in vielen Fällen nicht als störend erwiesen. Wo dies jedoch ins 

 Gewicht fiel, z. B. wenn Gift direkt auf isolierte Sporen einwirken sollte, mit- 

 übertragener Agar den Einfluß des Giftes auf die keimende Spore aber ver- 

 zögern könnte, ferner wenn möglichst gleichartige Entwicklungsbedingungen 

 für Einzell- und Vielzellkulturen gleichzeitig geschaffen werden sollten, habe 

 ich die Methode noch etwas modifiziert. Anstatt in dest. Wasser wurde die mög- 

 lichst geringe Sporenmenge in Nährlösung geschüttelt, dann in der gleichen 

 Weise, wie oben beschrieben, die Zahl der Sporen so verringert, daß, wenn die 

 zuletzt erhaltenen 50 ccm sporenhaltiger Nährlösung schließlich zu je 5 ccm 

 in Petri- Schalen ausgegossen wurden, höchstens in jeder 10 bis 20 Sporen 

 keimten. Man braucht nun kaum mikroskopisch zu kontrollieren; denn ist 

 wirklich einmal eine der mit der Platinnadel herausgefischten gekeimten Sporen 

 mit einer anderen im Zusammenhang geblieben, so löst sie sich bei der Über- 

 tragung in die Kölbchen entweder gleich oder sehr bald davon, und man hat 

 eben nicht eine Einzell-, sondern eine Zweizellkultur, die man dann einfach be- 

 seitigt. Öfter dagegen kommt es vor, daß die aufgefangenen Sporen beim Her- 

 ausnehmen der Nadel in die Schale zurückgleiten, so daß man eine spor6nlose, 

 steril bleibende Fehlkultur erhält. Die Sicherheit des sterilen Arbeitens und die 

 Einfachheit und Schnelligkeit, mit der man nach dieser Methode Einzellkul- 

 turen in großer Zahl erhalten kann, wiegen diesen unbedeutenden Übclstand 

 leicht auf. Will man absolut sicher gehen, so kann man durch Überführung 

 der gekeimten Spore zunächst in eine sterile feuchte Kammer mikroskopisch 

 genau feststellen, ob es sich in der Tat um eine einzelne Konidie handelt. Sehr 

 oft ist diese Prüfung unerläßlich und daher meist vorgenommen worden. 



2, Behandlung der Kulturg-cfäße und der ausgeschal- 

 teten Kulturen, 



Alle Kulturgefäße wurden vor der Benutzung von mir selbst mit Soda- 

 wasser ausgekocht und gebürstet, schließlich mit kochendem Wasser gespült. 

 Die ausgeschalteten Kulturen wurden fünf Minuten lang bei 120" autokia viert. 



