i58 lî. IV. — Maintien chez les invertébrés non Marins. 



hier douteux, après le travail de Hullu, que le /ni/icu vital de 

 l'Insecte ne possède de très près la composition minérale du ?ni- 

 lieu i'//rt/ de l'Homme, — c'est-à-dire celle de l'eau de mer, comme 

 il va résulter des deux Chapitres suivants. 



APPENDICE 



TECHNIQUE DES EXPÉRIENCES PERSONNELLES RAPPORTÉES PLUS HAUT 



Prise de l'hémolymphe ou du liquide coelomique. — Chez Aslacus fluvialilis, 

 procédé décrit déjà, p. 135, pour Carcinus mœnas, Maiasquinado, Homarus 

 vulgaris. 



Gliez Hélix pomatia, l'animai est déjà débarrassé delà plus grande partie 

 de sa coquille (partie ventrale). Une sonde cannelée est introduite dans la 

 chambre pulmonaire, par l'orifice très visible de celle-ci; le plafond de la 

 chambre pulmonaire est ainsi soulevé. Il suffit de l'entamer aux ciseaux 

 pour obtenir le plus généraleuient une quantité assez abondante d'hémo- 

 lymphe d'un beau bleu, légèrement mélangée de mucus. 



Chez Hirudo officinaiis, l'animal séché est étiré et iixé sur une planche de 

 liège. Ouverture des vaisseaux médians, qui donne une faible quantité d'un 

 beau sang rouge. Le tégument étant mince, il peut arriver qu'on ouvre le 



pathogènes : le B. subtilis; c) parmi les ciiampignoiis : YAspergillus niger, le 

 Muguet, VAclinomyces, Ja Teigne. 



« La première génération a été obtenue en ensemençant très largement 

 ciiaque liquide avec une culture développée sur gélose ordinaire. Après un 

 tem|)s de 8 jours à 1 mois, le micro-organisme s'est acclimaté dans ce nouveau 

 milieu. Avec quelques gouttes de la culture acclimatée, nous avons alors 

 ensemencé des tubes de 2'' génération <|ui se sont développés beaucoufi plus 

 vite, en 4 à 10 jours. Nous avons procédé de même, mais à des intervalles 

 beaucoup plus rapprochés, pour obtenir des 3", 4'', 5« et &''' générations. Enfin 

 chaque génération développée dans les liquides a été reportée sur le milieu 

 solide correspondant de gélose à l'eau de mer, et nous avons obtenu également 

 des cultures abondantes. Certains germes ont ainsi été conduits jusqu'aux 

 8* et 9*= générations. — Il nous semble permis de dire que les micro-organismes 

 qui ont satisfait à ces conditions prospèrent sur nos milieux à leau de mer. » 



Remarquons toutefois que les milieux de culture de Duflocq et Lejonne 

 devaient avoir été rendus toxiques par la stérilisation à 115°, ainsi que nous 

 l'ont montré un grand nombre d'cxjtériences (voir plus loin, II, F, page Jtj4, 

 et Livre III). La présence du phosphate de soude avait dû contribuer encore 

 à l'attaque du verre aux hautes températures de stérUisalion. Il serait intéres- 

 sant de voir si, eu stérilisant par simple lillrage, le milieu de culture ne devien- 

 drait pas plus favorable. 



Miz/.OM (1901), dans un travail de direction inverse, aboutit au même résultat 

 théorique. 11 isole un bacille vivant à l'élat naturel dans les eaux du vieux port 

 de Marseille. « Avec le bouillon lactose », ce bacille « ne donne pas de fermen- 

 tation. Sur pomme de terre, sa culture, du reste peu abondante, est invisible 

 microscopiquement. » Or, injecté intra-périlonéalement au Cobaye à la dose de 

 I^c pour 100 grammes, il tue l'animal en dix-huit heures. Ou le retrouve « en 

 culture pure dans les différents liquides organiques des animaux autopsiéSi... 

 Sa virulence est exaltée par les passages successifs aux animaux ». 



