494 Bestimmung der Nucleinbasen u. der Harnsäuse nach Kossei. 324. 



ab und wäscht uait Wasser, l)is das Filtrat auf Zusatz von Salzsäure 

 keine Trübung mehr giebt. Jetzt wird der rein weisse Pilterriickstand 

 in Wasser suspendirt und, nachdem man zum Sieden erhitzt hat, durch 

 tropfenweisen Zusatz von Schwefelammoniumlösung zersetzt. Ein Ueber- 

 schuss von Schwefelammonium ist zu vermeiden, das Absitzen des 

 Schwefelsilbers muss in der Wärme geschehen. Die abfillrirte klare, farb- 

 lose Flüssigkeit enthält Adenin und Hypoxanthin völlig in Lösung, Guanin 

 ist nur zum Theil (a) gelöst, ein anderer Theil (b) ist in den Schwefel- 

 silberniederschlag übergegangen. Man kocht deshalb diesen Nieder- 

 schlag mit verdünnter Salzsäure aus und sättigt das Filtrat mit Am- 

 moniak, nach einiger Zeit fällt das Guanin (b) völlig aus. Das in 

 Lösung befindliche Guanin (a) wird nach der Digestion mit Ammoniak 

 auf dem Wasserbad ausgeschieden. Man vereinigt beide Portionen auf 

 einem bei 110" getrockneten und gewogenen Filter, wäscht mit 

 ammoniakhaltigem Wasser gut aus, trocknet und wägt. Das ammo- 

 niakalische Filtrat, welches Adenin und Hypoxanthin enthält, wird nach 

 Zusatz eines Tropfens wässeriger Methylorangelösung tropfenweise mit 

 verdünnter Säure bis zum Auftreten von Eothfärbnng und nun mit 

 einer kalten concentrirten Lösung von Natriumpikrat so lange versetzt, 

 bis die ganze Flüssigkeit sattgelb gefärbt ist. Jetzt filtrirt man den 

 entstandenen Niederschlag von pikrinsaurem Adenin, am Besten mit 

 Hülfe einer Saugpumpe, durch gewogenes Filter ab, wäscht mit Wasser, 

 bis das Filter von aussen betrachtet nicht mehr gelb erscheint (das 

 Filtrat Ideibt stets gelblich), trocknet bei über 100" und wägt. Aus 

 der Formel des pikrinsauren Adenin C5 H5 N5. Cg H, (NOo)., OH kann 

 man leicht die Menge des Adenin berechnen ; zu der gefundenen Quanti- 

 tät Adenin muss man für je 100 CC. Filtrat 2,4 mgr Adenin hinzu- 

 addiren. Für die Hypoxanthinbestimmung wird fiü- den Fall, dass keine 

 Salzsäure zugegen ist, das Filtrat vom Adeninpikratniederschlag zum 

 Sieden erhitzt und allmälig mit Silbeinitratlösung versetzt. Nach dem 

 Erkalten wird noch mit etwas Silbernitrat auf Vollständigkeit der 

 Fällung geprüft, filtrirt, mit kaltem Wasser bis zur Farblosigkeit des 

 Filtrats ausgewaschen und bei 100" getrocknet. Der Niederschlag be- 

 stellt aus Hypoxanthinsilberpikrat C5 H3 Ag N4 . C« H, (NO2);, OH; 

 daraus berechnet sich leicht die entsprechende Menge Hypoxanthin; 

 von der so erhaltenen Quantität Hypoxanthin muss man 1,0 mgr ab- 

 ziehen. 



