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MILIEUX LIQUIDES ANIMAUX 



Les plus importants de ces milieux artificiels sont sans contredit les 

 bouillons de viande. Ce sont ceux que Ton emploie de beaucoup le plus 

 couramment. Malgré certaines incertitudes forcées dans leur composi- 

 tion, provenant de causes qui ont été exposées plus haut (p. 223), c'est 

 encore à eux qu'on aura recours le plus souvent parce qu'ils donneront 

 les meilleurs résultats. 



Bouillon de viande peptonisé. — Le bouillon de viande est sans con- 

 tredit le liquide nutritif à préférer. 11 se fait d'habitude avec les viandes 

 de bœuf, de veau, de cheval, de volaille, de poisson; les bouillons 

 faits avec la viande de veau paraissent les plus propres au développe- 

 ment microbien ; la viande de cheval donne d'aussi bons résultats que 

 celle de bœuf. Les morceaux assez finement découpés sonl misa décoc- 

 ter sur un feu doux, dans une quantité d'eau qui est d'habitude de 1 litre 

 par livre de chair. On écume soigneusement, après quelques bouillons, et 

 l'on maintient en ébullition pendant cinq heures. A la fin de l'ébullition, 

 on ajoute la proportion de peptones voulue, 1 p. 100 de l'eau employée. On 

 ramène aux proportions indiquées, en ajoutant de l'eau. Après refroi- 

 dissement, on dégraisse en enlevant d'abord la graisse qui s'est figée à la 

 surface, soit en siphonnant le liquide clair, puis on filtre sur papier 

 mouillé, on neutralise à l'aide de la solution saturée de bicarbonate de 

 soude ou de soude caustique, en faisant bouillir à nouveau. On recom- 

 mande souvent d'ajouter 6 à 8 grammes da sel par litre; d'après Mi- 

 quel (t), le bouillon salé est plus propre à la culture des Bactéries, ce 

 qui est loin d'être prouvé. Cette addition de sel doit se faire, d'après 

 Benoist (2), après la neutralisation et la filtration, pour éviter la forma- 

 tion d'un nouveau précipité. On peut donner des qualités spéciales à ces 

 bouillons en leur ajoutant une petite quantité de glucose et de glycérine, 

 de 1 à 2 p. 100 ou plus de chacune de ces deux substances. 



Le bouillon est ensuite porté à 120° dans l'autoclave. Il se trouble 

 souvent à chaud, par suite d'une précipitation de phosphates moins 

 solubles à chaud qu'à froid, mais reprend sa limpidité par le refroidisse- 

 ment. 



Le procédé suivant peut aussi être employé. On prend de la viande 

 de bœuf aussi fraîchement tué que possible, encore chaude même s'il 

 est possible, pour éviter l'acidité que détermine toujours une légère 

 altération: Celte viande finement hachée est mise dans un ballon avec 

 une fois et demie son poids d'eau et 1 gramme de peptones pour 100 de 

 liquide, puis le tout porté à 120° pendant vingt minutes dans l'auto- 

 clave. Le bouillon obtenu est à peu près neutre ; la faible acidité est 

 combattue avec de la soude caustique en solution. On filtre sur filtre 

 mouillé et l'on stérilise à une température qui ne doit pas dépasser 1 10°. 



Avant de répartir le bouillon dans les vases où l'on doit le conserver et 

 le faire servir, il esl à recommander de lui faire subir, en bloc, l'action 

 de l'autoclave ou du stérilisateur pendant quelque temps. Fréquemment, 

 en effet, les bouillons, obtenus comme il vient d'être dit, se troublent 



ll| Miquei,, Les organismes vivants de l'atmosphère. Thèse de Paris, 1882. 

 (2) Benoist, Préparation de quelques milieux nutritifs destinés à l'étude des Bac- 

 téries [Ann. de micr., 1888, |> 75). 



