MILIEUX DE CULTURES. 231 



de 100° à 120°. Une nouvelle filtration est alors nécessaire. Il est à 

 remarquer que les bouillons mal dégraissés, ou qui n'ont pas subi une 

 ébullition après la neutralisation, restent souvent opalescents et conti- 

 nuent;! précipiter, même longtemps après leur fabrication. Ce précipité 

 parait être constitué souvent par du phosphate de chaux, d'autres l'ois 

 par de la graisse émulsionnée ou en partie saponifiée. 



Procédés recommandés. — Il est plus simple et certainement au moins 

 aussi avantageux d'adopter la manière de l'aire suivante, qui donne un 

 excellent bouillon employé depuis longtemps au laboratoire de Koch, à 

 Berlin, sous le nom de Fleisch-infus-pepton, mot qu'on peut traduire 

 par macération de viande peptonisée. 



1° Cinq cents grammes de viande dégraissée sont hachés et mis 

 à macérer à basse température, pendant vingt-quatre heures, dans un 

 litre d'eau ; 



2° On passe et exprime dans un linge et, au besoin, on ramène au 

 volume de 1 litre ; 



3°Onchaufi'ejusqu'à ébullilionet l'on fait dissoudre de 10à20 grammes 

 de peptones sèches pour 1 litre ; 

 4° On filtre sur un filtre mouillé pour enlever la graisse ; 

 5° On alcalinise, jusqu'à réaction alcaline légère, mais nette; 

 6° On chauffe à l'autoclave à 120o pendant un quart d'heure, puis on 

 filtre à chaud ; 



7° On remplit les récipients voulus et l'on stérilise à l'autoclave. 

 Dans le cours des opérations employées pour préparer ces bouillons, 

 on peut être amené à ajouter d'autres substances, dans un but déter- 

 miné, des sucres, de la glycérine, etc. Ces additions ne font rien changer 

 à la technique indiquée. 



On obtient de très bons résultats, surlout pour l'obtention des pro- 

 duits toxiques du Bacille delà diphtérie et d'autres espèces pathogènes, 

 avec le bouillon préparé avec l'estomac de porc, suivant les indications 

 de Martin (1), désigné aussi sous les noms de bouillon de panse, 

 bouillon d'estomac de porc, bouillon Martin. 



Pour l'obtenir, on prend des estomacs de porc bien nettoyés et l'on 

 broie ou hache assez finement les tuniques muqueuse et musculaire. 

 Pour éviter les variations de teneur en pepsine provenant de causes 

 individuelles, il est bon d'opérer sur plusieurs estomacs à la fois, quatre 

 ou cinq par exemple. 



Le hachis obtenu est mis à macérer de douze à vingt-quatre heures, 

 vers 50°, dans de l'eau acidulée, dans les proportions suivantes : 



Hachis d'estomac de porc 200 grammes. 



Acide chlor hydrique 10 — 



Eau 1000 — 



On peut avec avantage ajouter des morceaux d'organes, poumons, 

 intestins, muscles: la quantité de pepsine présente est suffisante pour 

 qu'il y ait profita le faire. 



Après le temps voulu, on chauffe à 100° pendant quelques minutes 

 pour détruire la pepsine en excès, on filtre et l'on alcalinise au moment 

 où le liquide atteint environ 80°. On filtre sur papier ; on chaulïe 



M) Martin, Production de la toxine diphlêric(iïe lAun. de l'Iiist. Pasteur, XII, 

 1898, p. 26). 



