2 {<> TECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



d'observer de minimes modifications de ce liquide, en particulier une 

 légère coagulation. 



Le petit-lait a été vanté comme milieu de culture servant à différencier 

 certaines espèces. On peut le préparer en coagulant le lait par addition 

 d'un peu d'acide chlorhydrique ; on laisse reposer quelques heures pour 

 laisser le caillot exsuder du liquide qu'on sépare, filtre, neutralise et 

 stérilise à 100°. Pendant la chauffe, il peut encore se précipiter un peu 

 de matière albuminoïde ; on est alors obligé de filtrer et stériliser à 

 nouveau. 



Œufs. — On utilise parfois les œufs comme milieu de culture. On 

 peut, après avoir ouvert l'œuf à l'un des pôles avec des pinces flambées, 

 à l'aide de pipettes stérilisées, aspirer séparément le blanc et le jaune 

 qu'on répartit suivant les besoins. On peut aussi faire directement la 

 culture dans l'œuf que l'on a au préalable fortement secoué pour obtenir 

 le mélange du blanc et du jaune; l'ensemencement se fait par un petit 

 orifice fait à l'un des bouts bien flambé, avec un instrument stérilisé ; 

 le trou est ensuite obturé avec de la cire molle bien chauffée. Il faut se 

 souvenir que les œufs peuvent être infectés, avant la ponte, par des 

 microbes présents dans l'oviducte de la poule, et que la coquille humide 

 se laisse assez facilement traverser par des Moisissures ou des Bactéries. 



Enfin, on peut utiliser les ccufs cuits durs et coupés en tranches, qui 

 sont stérilisées après coup comme il sera dit ; ou simplement le blanc 

 coupé en morceaux qu'on stérilise également dans les vases que l'on 

 veut employer. 



'2° Milieux solides. 



Nous connaissons les avantages de ces milieux et nous allons décrire 

 la préparation de ceux qui sont le plus habituellement employés. 



Milieux nutritifs à la gélatine. — Les gelées à base de gélatine ont 

 été introduites dans la pratique des cultures de Bactéries par Klebs et 

 Brefeld. Leur emploi s'est beaucoup généralisé et perfectionné depuis ; 

 on peut dire qu'il forme un des points importants des études bactériolo- 

 giques. 



La gélatine qui sert à confectionner la gelée doit être choisie dans les 

 premières marques de fabriques françaises. La meilleure est celle qui 

 se vend sous les noms de gélatine extra-fine, blanc-manger, en paquets 

 enveloppés de papier bleu et à étiquette dorée. C'est avec celle-ci que 

 l'on obtient les gelées les plus belles et les plus transparentes ; les qualités 

 inférieures donnent un milieu qui reste presque toujours un peu trouble 

 ou légèrement laiteux, quoiqu'on fasse, et qui supporte mal les tempé- 

 ratures de stérilisation. La beauté de la gelée n'est du reste pas un 

 caractère essentiel. 



La quantité de gélatine qui doit solidifier un poids donné d'eau doit 

 varier suivant les circonstances et surloul suivant la saison. Tandis que 

 pendant la saison froide la proportion de 6 à l<> grammes de gélatine 

 pour 1<«> grammesd'eau suffit amplement pour donner une gelée très 

 consistante, il faut, pendant les fortes chaleurs de l'été, élever ce poids 

 à 12 ou 15 et même :><> grammes pour lOOgrammes d'eau ; il n'est guère 

 à recommander de dépasser 15 grammes; au-dessus, les caractères 

 culturaux peuvent être modifiés. On concasse les plaquettes de gélatine 



