MILIEUX DE CULTURES. 2 \ 3 



qu'on veul l'airedes mélanges plus complexes, de mettre dans ces gelées 

 les phosphates, si favorables cependant au développement des Bactéries. 



Au lieu d'ajouter des peptones sèches à la masse, on peut faire dis- 

 soudre la gélatine dans les différents bouillons dont la préparation a 

 été indiquée précédemment. On obtient ainsi, avec des bouillons de 

 viande peptonisée ou non, la macération de viande peptonisée surtout 

 (p. 231), une gélatine nutritive d'excellente qualité ; il faut toutefois 

 reconnaître que les gélatines à base de bouillon ou de macération de 

 viande sont beaucoup plus propices au développement des microbes 

 liquéfiants, surtout des Bacilles fluorescents, ce qui peut parfois être un 

 inconvénient, dans les analyses d'eaux par exemple, où la liquéfaction 

 totale du milieu survient plus vite qu'avec la gélatine peptonisée simple 

 La gelée préparée au bouillon de malt ou detouraillon peut être précieuse 

 à employer. On peut également employer dans le même but l'un quel- 

 conque des milieux chimiques donnés page 225. 



En général, mais surtout lorsqu'on se sert de gélatines de qualité 

 inférieure, il faut éviter, dans ces manipulations, l'emploi du feu nu et 

 une ébullil.ion prolongée, qui pourraient modifier la gelée et la rendre 

 impropre au but que l'on veut remplir. La température de 100° mainte- 

 nue assez longtemps, surtout en présence d'un léger excès d'alcali, peut 

 modifier le milieu de telle façon qu'il perd la propriété de se prendre en 

 gelée en refroidissant ; la même modification se produit plus facilement 

 encore aux températures élevées de l'autoclave. Le milieu renferme de la 

 gélatine-peptone, qui nesedistinguede la gélatine primitive que par l'im- 

 possibilité de sesodilifier par abaissement de la température. Ce produit 

 offre beaucoup des réactions des peptones vraies. Le fait est peut-être 

 aussi favorisé parla présence de produits provenant d'altérations anté- 

 rieures. 



La gélatine bien préparée fond à une température qui varie dans des 

 limites très restreintes avec la quantité d'eau qu'elle contient. Les 

 milieux qui contiennent une proportion de gélatine de 6 à 10 p. 100 

 sont liquides à "25°. On peut prendre '23° comme terme moyen, et 

 encore est-il prudent de régler les étuves où l'on veut placer des 

 cultures sur gélatine pour une température quinedoit pas dépasser 20°. 

 La légère évaporai ion d'eau, qui se fait forcément entre le moment 

 de la préparation de la masse et celui où on l'utilise, élève toujours de 

 quelques fractions de degré le point de fusion primitif. Il en est de même 

 de la consistance, qui est en rapport direct avec le point de fusion. Elle 

 est d'autant plus forte qu'il y a plus de gélatine dans la masse, où 

 elle s'élève sensiblement par suite de la dessiccation. Avec de fortes 

 proportions de gélatine, 15 p. 100 et plus, on peut obtenir des gelées 

 supportant 2i° sans se liquéfier ; c'est une indication qui peut être pré- 

 cieuse; toutefois, les gelées dont la teneur dépasse 15 p. 100 ne donnent 

 plus des caractères culturaux aussi nets ; sauf dans les cas spéciaux, il 

 est bon de ne pas dépasser cette dernière proportion. 



En se servant de très bonne gélatine et en n'employant pour la stéri- 

 lisation que des températures de 85° à 90° qu'on fait agir à trois ou 

 quatre reprises, pendant une demi-heure à une heure à vingt-quatre 

 heures d'intervallechaquefois, on peut obtenir des gelées qui ne se liqué- 

 fient qu'à 28°, même 30° et un peu au-dessus, surtout si l'on a soin de 

 les laisser reposer pendant plusieurs jours à une température froide. 



