246 TECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



d'heure. On verse le contenu bouillant dans un autre ma Iras contenant 

 120 à 1 50 grammes de gélatinequ'on fait dissoudre. On ajoute delà soude 

 jusqu'à alcalinisation légère. On chauffe à 110° pendant un quart 

 d'heure. Puis on acidifie avec une solution demi-normale d'acide sulfu- 

 rique, de telle sorte que 10 centimètres cubes de gélatine aient une 

 acidité telle que celle-2i disparaît par l'addition de CC ,2 de solution demi- 

 normale de soude, acidité correspondant à 0,5 d'acide sulfurique par 

 litre. On introduit les 28 r ,50 de sulfate de magnésie et Ton répartit en 

 tubes de 10 centimètres cubes. 



Au moment de l'emploi, on introduit dans chaque tube de gélatine 

 1 centimètre Cube d'une solution de lactose à 35 p. 100 et O cc ,l d'une 

 solution phéniquée à 2,5 p. 100. 



Milieux nutritifs à la gélose. —Les gelées à base degélatine, malgré 

 leurs incontestables avantages, sont forcément d'un emploi limité. 

 Quelle que soit la quantité de gélatine que Ton y met, la masse fond 

 vers 23° à 24°. D'où impossibilité d'arriver à un beau développement 

 pour beaucoup d'espèces, qui présentent un optimum de végétation 

 à un degré supérieur, et une absence totale de multiplication pour cer- 

 taines, des pathogènes surtout, qui exigent une température voisine 

 de 37°.' De plus, de nombreuses Bactéries liquéfiant très rapidement 

 ces gelées, il peut en résulter des difficultés dans leur diagnose et 

 l'obtention de cultures pures. 



Chez certaines plantes, les membranes cellulaires peuvent se trans- 

 former, en tout ou en partie, en une substance isomère de la cellulose, 

 qui, dure et cornée à l'état sec, possède la propriété de se gonfler énor- 

 mément sous l'influence de l'eau, de donner, en absorbant une grande 

 quantité de ce liquide, de la gelée ou du mucilage. Les couches ainsi 

 modifiées sont dites gélifiées ; elles ne donnent plus les réactions carac- 

 téristiques de la cellulose, en particulier elles ne bleuissent plus par 

 l'acide sulfurique et l'iode ou par le chlorure de zinc iodé. Cette trans- 

 formation des membranes cellulaires en mucilage est fréquente chez les 

 Algues. 



Les gelées ainsi produites présentent, entre autres caractères, celui 

 de ne fondre qu'à une température élevée; un très petit nombre de 

 Bactéries, celles qui s'attaquent à la cellulose, arrivent seules à les 

 liquéfier. A ce double point de vue, elles remplissent lesdeux desiderata 

 signalés dans l'emploi des masses à la gélatine. 



Par contre, pures, elles ne possèdent, leur composition chimique le 

 prouve, que des propriétés nutritives très faibles, pour ne pas dire 

 nulle-, tant est restreint le nombre d'espèces qui peuvent se nourrir de 

 cellulose simple ou peu modifiée. Aussi faut-il les additionner de prin- 

 cipes nutritifs en proportions assez fortes, ou user, pour les préparer, 

 de bouillons obtenus d'après les formules indiquées précédemment. 



Miquel (1) a songé le premier ;'i se servir de ces mucilages végétaux 

 pour les cultures sur milieux solides à une température supérieure 

 à 25«. u utilisait la gelée formée par le Chondrus crispus Lyngb., 

 Algue marine de la famille des Gigarlinées, ordre des Florîdées. On la 

 trouve sur les cùtesde l'Atlantique, depuis les Açores jusqu'en Norvège. 

 Elle est très employée à la confection de celées commerciales et connue 



l Miquel, Septième mémoire sur les organismes microscopiques de l'air et des 

 eaux Annuaire de l'Observ. de Montsouris pour 1885, p. 467). 



