STÉRILISATION. 253 



cultures ; le jaune d'oeuf additionné de j p. 100 de glycérine donne un 

 milieu de belle apparence. 



Bouillie de viande. — La viande est finement hachée et cuite un 

 certain temps, de un quart d'heure à une heure et plus, suivant la 

 quantité, à l'autoclave à 120°. L'emploi de ce milieu peut être utile dans 

 des cas spéciaux. 



Substances inertes imbibées de liquides nutritifs. — On prend du 

 sable, de petits blocs de plâtre ou, mieux, des morceaux de terre de pipe, 

 qu'on place dans des vases appropriés avec une quantité suffisante du 

 liquide que l'on désire employer. Le liquide, en excès, imprègne le 

 substratum. La stérilisation se fait comme d'habitude. 



3° Stérilisation. 



La condition essentielle pour observer le développement des différentes 

 espèces de Bactéries est d'écarter des cultures tout germe étranger à 

 celui que l'on veut étudier. Les impuretés d'une culture peuvent 

 provenir de trois sources différentes : du milieu où elle croît, qui n'était 

 pas débarrassé de germes ; de l'air qui peut venir la contaminer lorsqu'on 

 ouvre le vase pour l'observation ; et enfin de la matière qui a servi à 

 ensemencer la culture, qui contenait des espèces autres que celle en 

 question. On verra plus loin quelles précautions on doit prendre pour 

 éviter l'apport de germes étrangers par l'air, apport bien moins fréquent 

 qu'on ne peut le supposer, et quelles facilités certains procédés spéciaux, 

 l'emploi des cultures sur plaques de gélatine surtout, offrent pour isoler 

 avec toute certitude les espèces les unes des autres. Nous devons nous 

 occuper ici de la première seulement des trois causes de contamination 

 signalées et des moyens d'y obvier. 



On peut, nous l'avons vu, obtenir certains milieux, des liquides nor- 

 maux ou pathologiques de l'organisme principalement, absolument purs 

 de germes, en les recueillant avec toutes les précautions nécessaires 

 pour n'en pas introduire ; il est possible alors de les employer tels quels. 



Les conditions sont d'habitude plus complexes. La masse nutritive 

 peut renfermer plusieurs espèces de Bactéries dont le développement 

 viendra se mêler avec celui de l'espèce étudiée ou l'empêcher complè- 

 tement. C'est le cas le plus fréquent, même avec les milieux préparés à 

 une température voisine de 100° ; on a vu que beaucoup de spores résis- 

 taient souvent pendant un temps assez long à ces hautes températures. 

 D'un autre côté, le vase qui renferme la masse nutritive garde toujours 

 des germes après ses parois où les ont déposés l'eau qui a servi au net- 

 toyage ou l'air qu'y ont introduit les manipulations. Il faut à tout prix 

 tuer ces cellules ou ces spores gênantes, il faut stériliser le milieu où 

 l'on doit provoquer le développement d'une espèce donnée, et cela d'une 

 façon certaine et absolue. 



C'est Pasteur qui, dans ses recherches sur la génération spontanée (1), 

 a, le premier, fait ressortir l'importance extrême d'une stérilisation 

 absolue des milieux et appareils à employer. On doit considérer avec 

 lui cette opération comme la véritable hase des études bactériologiques. 



fl) Pastkur, Mémoire sur les corpuscules organisés qui existent dans l'atmosphère 

 (Ann. de chim. et de p/u/s., LXIV, J862). 



