PRATIQUE DES CULTURES. 



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Fig. 123. — Culture en cellule sur porte-objet. 



On prépare de môme des cultures sur autres substances amylacées, 

 empois d'amidon, pâte de pain, riz cuit, carottes, etc. 



Cultures sur porte-objet. — Lorsqu'on veut suivre, sous le micro- 

 scope, pendant un temps assez long, le développement des Bactéries, il 

 faut recourir à un dispositif qui permette; l'observation à tout instant en 

 même temps qu'il n'entrave en rien les conditions de nutrition indispen- 

 sables à la vie. 



L'usage de cellules de verre, employées depuis longtemps pour 

 l'étude des Champignons inférieurs l i, répond à toutes les nécessités. 



Ces appareils consistent en un anneau de verre, de hauteur et de dia- 

 mètre variables, collé sur un porte-objet à l'aide de baume de Canada 

 ou de tout autre adhésif (fig. 123, C). La cavité ainsi limitée peut être 

 close en haut par une 

 lamelle qui doit s'ap- 

 pliquer exactement 

 sur le bord supérieur 

 rodé de l'anneau 13. 

 Il est facile d'en pré- 

 parer soi-même. On 

 prend un tube de 

 verre épais de 1 à 2 mil- 

 limètres et, à l'aide 

 d'une lime triangu- 

 laire et d'un charbon ardent, on en sépare des segments de 5 à 6 mil- 

 limètres de hauteur. Ces anneaux sont usés à l'émeri sur les bords 

 de façon à les dresser parfaitement et à les amener à être parfaite- 

 ment parallèles l'un à l'autre. On colle l'anneau sur un porte-objet en 

 garnissant sa face inférieure d'une légère couche de baume de Canada 

 et on laisse sécher. Une lamelle, qui s'applique sur le bord supérieur 

 enduit de vaseline au sublimé, obture complètement la chambre. En 

 mettant une goutte d'eau pure au fond de la cavité sur le porte-objet et 

 une goutte de bouillon ou de tout autre milieu nutritif (P) sur la face 

 inférieure de la lamelle, on aura à sa disposition un milieu isolé de tout 

 contact extérieur, pouvant suffire à approvisionner pendant un temps 

 assez long les Bactéries qui s'y développent. De plus, l'observation, 

 même au moyen d'objectifs forts, sera possible à tout instant, les cel- 

 lules se répandant dans le liquide et atteignant vile la face inférieure de 

 la lamelle. 



La cellule est rapidement stérilisée dans la flamme ou dans l'alcool 

 à 95° ; à l'aide d'une pipette stérilisée, on dépose au fond une goutte d'eau 

 pure. Le bord libre est enduit de vaseline au sublimé. On passe une 

 lamelle dans la flamme, on y dépose une goutte de bouillon stérilisé et, 

 à l'aide d'un fil de platine préalablement rougi puis refroidi, une très 

 faible parcelle contenant l'espèce à étudier. La lamelle est appliquée sur 

 l'anneau, la face qui porte la goutte tournée naturellement vers la cavité. 

 La couche de vaseline la maintient fixée contre l'anneau de verre et 

 s'oppose en outre à l'entrée de l'air, qui pourrait apporter des germes 

 étrangers. Le développement se fait plus vite à la surface libre de la 

 goutte; aussi, avec les objectifs à court foyer, doit-on examiner surtout 



(1) Van Tieghem et Le Monnibr, Recherches sur les Mucorinées {Ann. des se. mit.. 

 Bot., 5-' sér., t. XVII, 1S73 . 



