282 TECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



surprenante des colonies qu'elles donnent en cultures sur plaques, et 

 d'une haute importance pratique au point de vue de la recherche de 

 certaines espèces nuisibles qui peuvent contaminer ce liquide. 



Le chilï're des Bactéries que peut contenir une eau varie dans des 

 limites très étendues, en relation directe avec les causes de contami- 

 nation qui peuvent agir sur elle. Nous passerons toutes ces causes en 

 revue dans la troisième partie de ce livre. Nous supposerons donc avoir 

 affaire à un liquide d'une teneur moyenne en germes, comme le sont 

 beaucoup d'eaux potables des grandes villes; il sera facile ensuite de 

 discuter la marche à suivre dans des conditions différentes. 



Le milieu qui va servir est la gélatine nutritive, dont la préparation a 

 été indiquée page 240. La consistance de la gelée, et par conséquent la 

 quantité de gélatine sèche à employer, doit légèrement varier suivant la 

 température du milieu où l'on opère. Il sera presque toujours plus com- 

 mode de prendre 8 à 10 p. 100 de gélatine ; dans les fortes chaleurs de 

 l'été, il faudra augmenter ce poids et arriver à 12 et 15 p. 100 et même 

 plus, si l'on ne dispose pas de moyens de maintenir la température à un 

 degré assez bas pour que la gelée fasse rapidement prise et se main- 

 tienne solide. Il faut éviter d'ajouter à la gélatine qui doit servir aux cul- 

 tures sur plaques du sel ou du sucre, si favorables cependant au dévelop- 

 pement des Bactéries ; par suite de la dessiccation de la couche de gelée, il 

 se formerait des amas de petits cristaux très gênants pour l'observation. 



Quelques tubes de gélatine bien transparente, stérilisés en toute 

 assurance, sont mis dans un vase contenant de l'eau à une température 

 de 40° environ. La gelée fond rapidement. Par addition d'un peu d'eau 

 froide 1 , on fait tomber la température vers 30°. On s'assure que les 

 bouchons d'ouate des tubes n'adhèrent pas à la paroi; dans le cas con- 

 traire, on les détache en les tordant plusieurs fois sur eux-mêmes, sans 

 arriver à déboucher complètement le tube. On prend, à l'aide d'une 

 mince pipette stérilisée, une petite quantité de l'eau à analyser, qui doit 

 être recueillie avec toutes les précautions convenables d'après des 

 méthodes expliquées plus loin, et qui sera agitée au préalable, afin de 

 répartir au mieux dans la masse les germes qu'elle contient. On 

 débouche un tube et on laisse rapidement tomber une ou plusieurs 

 gouttes de la pipette; on replace, tout de suite, la bourre d'ouate. Le 

 tube est doucement secoué et roulé entre les doigts pour bien mêler 

 l'eau et la gélatine, en évitant la formation de bulles d'air dans 

 la masse et en ayant soin de ne pas projeter du contenu sur la bourre. On 

 le marque d'un numéro 1, c'est la dilution originale. Une seconde 

 dilution est obtenue en mélangeant une ou plusieurs gouttes de cette 

 première à la gélatine d'un second tube ; elle est désignée par le 

 numéro 2. Une même quantité de la seconde dilution ajoutée au contenu 

 d'un troisième tube donne une troisième dilution, notée avec le chiffre 3. 

 En procédant de la même façon, on peut obtenir des dilutions plus 

 étendues, précieuses lorsque la teneur en Bactéries est élevée. 



Les tubes ainsi préparés sont laissés quelques minutes dans de l'eau à 

 une température de 25° environ; quand ils sont descendus à ce degré, 

 ils peuvent être coulés sur les plaques de verre. 



On se servait de plaques de verre de 10 à 12 centimètres de large sur 

 14 ou 15 de longueur que l'on a stérilisées d'avance dans une boîte 

 métallique lig. 126), dans le stérilisateur à air chaud. On retire les 



