PRATIQUE DES CULTURES: 287 



encore, en prenant toutes les précautions nécessaires et en usant de 

 boîtes de Pétri, celle qui est à recommander, qui donne les résultats 

 les plus complets et qui, pratiquement, est la plus simple et la plus facile 

 à appliquer. 



Les germes, dont on observe le développement dans les cultures 

 sur plaques, peuvent ne pas provenir tous de la substance à exa- 

 miner. 



Un certain nombre d'entre eux ont été déposés par l'air, durant le 

 cours de manipulations. Lorsqu'on prend soin de recouvrir chaque plaque 

 d'une cloche pendant le refroidissement de la gélatine, et qu'on opère 

 dans un milieu où l'air n'est pas agité, l'apport de germes par l'atmo- 

 sphère peut être considéré comme rare ou au moins peu important. 

 C'est ce qui résulte de nombreuses expériences, de celles de Miquel en 

 particulier (1). Il en est de même pendant les premiers jours des cultures, 

 où elles ne servent encore que très peu ou pas du tout et restent enfer- 

 mées dans la chambre humide, si celle-ci a été soigneusement stérilisée. 

 Mais, dès qu'on les manie souvent pour les examiner, la contamination 

 se fait et parfois même dans une large proportion. Il est toutefois facile 

 de distinguer les colonies de ces germes de l'air qui ne se trouvent qu'à 

 la surface de la gélatine, tandis que les autres se trouvent aussi dans les 

 parties profondes ; de plus, avec un peu d'expérience, on appprend vite 

 à connaître l'aspect des colonies des premiers. Il est du reste aisé de se 

 rendre compte de la moyenne des contaminations, en exposant des 

 plaques témoins à côté des véritables plaques de culture ; on reconnaît 

 alors que la contamination est loin de se faire dans d'aussi larges limites 

 que le prétendent beaucoup d'observateurs, mais au contraire que c'est, 

 la plupart du temps, lorsque toutes précautions sont prises, un facteur 

 presque négligeable. On évite en majeure partie les impuretés de l'air 

 en faisant les cultures en vases clos, en cristallisoirs couverts, en boîtes 

 de Pétri, en tlacons d'Erlenmeyer, en fioles plates ou surtout en tubes 

 d'après le procédé d'Esmarch, mais, dans ces derniers cas, on perd ainsi 

 bien des avantages de la méthode. 



L'apparition des colonies se fait plus ou moins tôt dans ces cultures, 

 suivant les conditions de température et les espèces auxquelles on a 

 affaire. D'habitude, on les remarque comme un piqueté blanc, surtout 

 si la plaque se détache sur un fond noir, au bout de dix-huit à trente- 

 six heures. A un faible grossissement, 25 à 55 diamètres, elles se 

 distinguent comme autant de petites taches sphériques ou discoïdes 

 blanches, grises, jaunâtres, opaques ou plus ou moins transparentes. 

 Ce n'est souvent qu'après quelques jours qu'elles prennent un aspect 

 véritablement caractéristique. Beaucoup ont alors gagné la surface de 

 gélatine, où elles se sont épanouies. C'est du deuxième au cinquième 

 jour que l'étude des plaques est particulièrement instructive. Si nous 

 examinons, après une telle durée, une culture d'eau préparée comme il a 

 été dit précédemment, nousy trouvons tout un ensemble de colonies dont 

 la diversité d'aspect nous surprendra souvent (fig. 134 et 135). Les unes 

 ne modifient pas l'aspect ni la constitution de la gelée nutritive ; ce sont 

 de petits disques plus ou moins étalés sur la surface libre, des portions 



(1) Miquel, Les organismes vivants de l'atmosphère, Paris, ixs2, et Annuaire <le 

 Montsouris, 18S0-1891. 



