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timètre de côté qu'on superpose à la face postérieure du cristallisoir. 

 On compte, en marquant de points d'encre, le nombre de colonies que 

 renferme chacun de ces carrés, à la même place ou à des endroits 

 divers et choisis comme représentant, en apparence, une bonne moyenne 

 de colonies, on établit une moyenne à laide de laquelle le nombre total 

 s'obtient avec une approximation suffisante. 



L'emploi d'une figure comme celle représentée figure 13<î, tracée en 

 blanc sur fond noir ou simplement établie sur ardoise, permet de 

 faire aisément des numérations en différents sens. Son diamètre, 

 de 10 centimètres, est celui des boites de Pétri d'un usage courant. 

 La numération peut se faire par quart de cercle, par centimètre carré, 

 en établissant une moyenne et se servant du centimètre carré médian 

 divisé en cinq parties, lorsque les colonies sont nombreuses et assez 

 difficiles à compter ; par huitième ou par seizième de cercle, lorsque la 

 répartition des colonies paraît être inégale dans une direction rayon- 

 nante, ce qui arrive quand le milieu de culture n'a pas partout une 

 môme épaisseur. 



Lorsqu'on a obtenu une moyenne par centimètre carré, il est facile, 

 avec la formule 7rR 2 , d'avoir la surface totale de la culture et d'obtenir 

 le chiffre total. 



3. CULTURES DES ANAEROBIES 



Les espèces anaérobies ne pouvant, dans les conditions ordinaires, 

 se développer en présence d'oxygène libre, il faut, pour les étudier, 

 modifier les procédés habituels. 



Le but cherché est la disparition de l'oxygène. Suivant le cas, celle 

 absence d'oxygène doit être totale: il est des espèces qui l'exigent ; elle 

 peut n'être que partielle : beaucoup d'anaérobies supportent la présence 

 de petites quantités de ce gaz; pour Fermiet Bassi (1), une petite propor- 

 tion d'oxygène serait même toujours nécessaire. 



On peut réussir en mettant en œuvre différents moyens. L'emploi du 

 vide donne d'excellents résultats. Il en est de même des cultures faites 

 dans une atmosphère de gaz inerte. Il est également possible, après 

 avoir chassé tout gaz du milieu, d'empêcher plus ou moins tout nouveau 

 contact avec l'air. Enfin, l'oxygène présent peut être éliminé en pro- 

 voquant son absorption par des produits qui en sont avides ou par des 

 microbes aérobies. 



Les différentes méthodes employées se classent dans les quatre caté- 

 gories suivantes : 



1° Emploi du vide obtenu par la machine pneumatique, la pompe à 

 mercure ou la trompe à eau ; 



2° Privation d'oxygène par passage prolongé d'un gaz inerte dans le 

 milieu; 



3° Privation d'oxygène par ébullition du milieu et refroidissement à l'abri 

 de l'air, sous une couverture protectrice ou en présence d'un gaz inerte; 



4° Absorption de l'oxygène par des substances chimiques ou des 

 microbes aérobies. 



On obtient souvent les meilleurs résultats en combinant les effets de 

 deux ou plusieurs de ces procédés, employant à la fois le vide et la pré- 



|l) Ferhi et Bassi. Réf. in Revue générale de puth. interne, III, 1900, n° iti. p. 392 



