298 TECHNIQUE BACTERIOLOGIQUE. 



Nous avons vu précédemment (p. 278) la modification proposée par 

 Roux pour obtenir des cultures sur pommes de terre à l'abri de l'oxygène. 



2° Méthodes basées sur la privation dair par un courant de gaz 

 inerte. — Pasteur (1), dans ses recherches sur la vie sans air, ense- 

 mençait les espèces qu'il étudiait, et tout particulièrement le Bacillus 

 butyricus, dans des liquides privés d'air, en y faisant barboter, pendant 

 un temps assez prolongé, un courant d'hydrogène et d'acide carbonique. 

 C'est encore un des moyens les plus simples auxquels on puisse avoir 

 recours, en variant le dispositif de l'appareil suivant les besoins. Le 

 vase, ballon ou tube de verre contenant le bouillon de culture ou la 

 gelée maintenue liquide au bain-marie, est muni d'un bouchon de 

 caoutchouc traversé par deux tubes de verre munis de robinets. Le tube 

 d'arrivée du gaz plonge jusqu'au fond du milieu nutritif, l'autre dépasse 

 à peine le bouchon. Le gaz inerte barbote dans le liquide et lui enlève 

 peu à peu l'oxygène qu'il contient en s'y substituant ; il arrive même à 

 constituer en entier l'atmosphère de l'appareil. L'ensemencement se fait 

 à une température qui ne doit pas être supérieure à 40° ; après avoir fait 

 passer le gaz inerte pendant un certain temps, le courant gazeux doit 

 être continué après pour enlever l'air apporté par celte opération. 



On ferme les deux robinets, ou l'on met l'extrémité du tube de déga- 

 gement sous le mercure d'une cuve, ce qui permet de recueillir faci- 

 lement les produits gazeux qui peuvent se dégager. Lorsqu'on possède 

 une trompe à mercure ou à eau, ou tout autre appareil à faire le vide, 

 il est bien plus facile d'enlever toute trace d'air en faisant le vide plu- 

 sieurs fois de suite dans l'appareil et y laissant rentrer chaque fois du 

 gaz inerte. Les gaz employés peuvent être l'azote, l'hydrogène ou l'acide 

 carbonique. Ce dernier est plutôt à rejeter, car il exerce une action 

 toxique sur plusieurs Bactéries. L'azote est relativement difficile à pré- 

 parer. C'est l'hydrogène qu'il est le plus facile de se procurer, surtout 

 à l'aide d'un appareil à production continue, très simple à monter el 

 d'un usage courant dans tous les laboratoires de chimie; il doit être 

 pur, être dépourvu surtout d'hydrogène sulfuré et d'oxygène; on le 

 dépouille du premier gaz en le faisant barboter dans une solution 

 d'acétate de plomb et du second en le faisant traverser un flacon contenant 

 une solution alcaline d'acide pyrogallique. Ferran (2) conseille l'acéty- 

 lène, si facile à obtenir à l'aide du carbure de calcium et de l'eau. D'après 

 Kladakis (3), le gaz d'éclairage n'est pas à employer ; il est nuisible à 

 beaucoup de Bactéries ; il réussit cependant dans bien des cas et évite 

 alors une préparation spéciale. Lorsque les gaz provenant du dévelop- 

 pement des Bactéries anaérobies doivent être analysés, l'emploi de 

 l'hydrogène ou de l'acide carbonique doit être évité ; ces deux gaz se 

 retrouvent en effet toujours dans les produits des fermentations occa- 

 sionnées par ces êtres; il deviendrait délicat ou impossible de séparer le 

 gaz dégagé du premier. On peut alors se servir d'azote ou, mieux, faire 

 simplement la culture dans le vide obtenu avec la trompe. 



(1) Pasteuh, Animalcules infusoires vivant sans gaz oxygène libre (C. R. de VAc&d. 

 des se, LU, 1861, p. 344), et Études sur la bière. Paris, ls"6, p. 282. 



(2) Ferran, Ueber die Verwendung des Acetylens bei der Kultur anaorober Bakterien 

 [Cenlralbl. fur BâkL, XXIV, 1808, p. 29). 



(3) Kladakis, Ueber die Einwirkung des Leucbtgases auf die Lebensthâtigkeit der 

 Mikroorganisincn. Berlin, I 81*0. 



