302 * TECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



R. Wurtz et Foureur (1) disent avoir obtenu de très bons résultats de 

 l'emploi de l'ébullition, puis du gaz d'éclairage pour la culture de cer- 

 taines espèces anaérobies types, entre autres le Vibrion septique, le 

 Bacille du charbon symptomatiquë et le Vibrion butyrique. Leur pro- 

 cédé est très simple et mérite d'être employé ; il permet d'obtenir de 

 grandes quantités de cultures. Ils enlèvent d'abord l'oxygène que con- 

 tient le milieu nutritif en faisant bouillir ce dernier, bouillon, gélatine 

 ou gélose, en présence du gaz d'éclairage. Leur dispositif est très pra- 

 tique ; il suffit de brancher le tube d'arrivée du gaz au col d'un matras 

 et d'adapter, sur une tubulure latérale soudée à la base de ce col, un 

 second tube de caoutchouc se rendant au brûleur de Bunsen. On peut 

 aussi adopter un dispositif plus simple, semblable à celui de la fi- 

 gure 148. Le gaz arrive à la surface du milieu nutritif avant de brûler. 

 On fait passer le courant de gaz pendant quelques secondes avant 

 d'allumer le brûleur, afin d'éviter la formation d'un mélange détonant. 

 Une ébullition de quelques minutes suffit. Le milieu est ensuite réparti 

 par la tubulure latérale dans des tubes à essai où l'on a chassé l'air par 

 un courant de gaz. Lorsque la quantité de milieu est suffisante, tout en 

 laissant arriver encore le gaz par un tube de verre plongeant jusqu'au 

 fond du vase, on verse à la surface quelques centimètres cubes de 

 pétrole ou d'huile stérilisés. Les tubes sont stérilisés à l'autoclave. Pour 

 ensemencer, on fait arriver à nouveau du gaz dans le tube, on incline 

 celui-ci de manière à découvrir le milieu et l'on inocule avec le fil de 

 plaline. Il est possible, en opérant ainsi, d'obtenir des cultures sur 

 plaques de gélatine d'espèces anaérobies en disposant les plaques sous 

 une cloche bien suiffée, à ses bords, traversée par un courant de gaz 

 d'éclairage, telle que celle représentée figure 137 ou toute autre ana- 

 logue. 



4° Méthodes basées sur V absorption de V oxygène par des substances 

 chimiques. — On arrive très commodément à de bons résultats en 

 ajoutant préalablement aux gelées nutritives bouillies d'avance et main- 

 tenues fondues différentes substances facilemen t oxydables qui absorbent 

 assez vite les traces d'oxygène que le milieu peut encore contenir ou 

 celles qui peuvent y revenir par diffusion. Kitasato et Weil (2) recom- 

 mandent à ce point de vue le formiate de soude, que l'on ajoute à la 

 gélose ou à la gélatine en proportion de 0,3 à 0,5 p. 100 ; Salomonsen (3) 

 indique le suif o-indigol aie de soude en proportion de 0,1 p. 100. 

 Liborius(4j conseille avec ce dernier corps d'ajouter 2 p. 100 de glucose 

 favorable au développement de beaucoup d'espèces et contribuant aussi 

 à absorber de l'oxygène lorsqu'il est en milieu alcalin comme dans 

 l'espèce (5). Après ensemencement, il est bon de verser dans le tube un 

 peu de vaseline liquide ou d'huile stérilisées ; cette couche de 1 à 2 cen- 

 timètres préserve les couches superficielles du milieu de la diffusion de 



(1) H. Wubtz et Foureur, Sur un procédé facile de culture des microorganismes 

 anaérobies {Arch. de méd. expèr., I, 1889, p. 523). 



(2) Kitasato et Weil, Zur Kenntniss der Anaeroben (Zeitschr. fur Hygiène, VIII, 

 1890). 



(3) Salomonsen, Bacteriological Technology, 1889. 



(4) LiBomus, Zeitschr. fur Hygiène, I, 1886. 



(5j Smith, Ui ber die Bedeutung des Zuckers in Kulturmedicn fur Bakterien (Cen- 

 Iralbl. fur Buld., XVIII, 1895, p. 1). 



