CULTURES DES ANAEROBIES. 



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Seulement, clans toules ces conditions, on n'obtient jamais de cul- 

 tures en surface, avec la gélatine ou la gélose; uniquement en piqûre 

 profonde, dans les couches inférieures, ou dans le liquide si c'est un 

 bouillon que l'on emploie. 



On avait voulu rapporter ce développement d'anaérobies en présence 

 d'air à la diffusion dans le liquide d'un ferment spécial; il semble bien 

 que ce soit la seule absorption de l'oxygène qui intervienne. 



Ce sont là des procédés qui peuvent être commodes à utiliser pour la 

 préparation de grandes quantités de toxines, par exemple. 



Pour obtenir facilement une culture d'un microbe anaérobie qui puisse 

 servir à se familiariser avec ces différents procédés, Wurtz conseille 

 d'immerger dans un tube à essai rempli aux trois quarts de gélose 

 bouillante un ou deux haricots ordinaires. En mettant ce tube à 'étuve 

 à 37°, le lendemain on doit avoir une culture abondante de Bacillus 

 butyricus. On peut aussi s'adresser au Vibrion septique, que l'on obtient 

 souvent du premier coup en inoculant à un cobaye, dans une petite bou- 

 tonnière de la peau du ventre, une petite quantité de terre de jardin; la 

 mort survient le plus souvent en trente-six heures ; le sang ou la sérosité 

 péritonéale servent de matière d'ensemencement. La terre, les matières 

 fécales diverses, contiennent beaucoup d'anaérobies intéressants à 

 étudier. 



En combinant ces procédés, on peut facilement obtenir des cultures 

 sur plaques à l'abri de l'oxygène. Ces cultures, faites à l'aide de gélatine 

 ou de gélose au mieux glucosées à 2 p. 100, bouillies et refroidies au 

 degré voulu en présence d'hydrogène, sont placées sur une étagère, 

 sous une cloche dont la base plonge dans un cristallisoir renfermant 

 un peu de vaseline liquide. Cette cloche est traversée par un courant 

 d'hydrogène que l'on peut supprimer après une demi-heure environ; 

 elle peut en outre contenir une capsule dans laquelle on dépose en 

 dernier un mélange de solution d'acide pyrogallique et de lessive de 

 potasse destiné à absorber les dernières traces d'oxygène. Si l'on emploie 

 les boîtes de Pétri, il faut les disposer de façon que leur obturation ne se 

 fasse pas bien, en maintenant le couvercle légèrement soulevé par 

 exemple, pour que la réaction puisse opérer sur l'air qui s'y trouve. 



Marino (1 ) ensemence dans de la gélose glucosée, comme dans le procédé 

 Veillon (p. 303), puis coule dans la partie supérieure d'une boite de 

 Pétri stérilisée et applique à la surface le fond de la partie inférieure; 

 le milieu se trouve pressé entre deux surfaces de verre stériles. On 

 met à l'étuve en couvrant le tout d'un couvercle de verre. Les colonies 

 se développent ; pour les prélever, on sépare doucement les surfaces de 

 verre. Malheureusement, la gelée se disloque souvent ; le prélèvement 

 expose à des contaminations par l'air. 



L'isolement des anaérobies peut se faire aisément aussi en usant soit 

 du procédé de Vignal (p. 300), soit, mieux, de celui de Veillon (p. 303 . 

 qui remplacent avantageusement dans ce but les cultures sur plaques. 



On peut employer, pour l'observation des anaérobies sous le microscope, 

 la chambre à gaz de Ranvier décrite précédemment (p. 280). Les deux 

 tétons latéraux du porte-objet métallique sont mis en communication 



(1) Marino, Méthode pour isoler les anaérobie- [Ann. de Vlnst. Pasteur, XXI, 1907. 

 p. 1005). 



