ENSEMENCEMENT DES CULTURES. 311 



ajoutant au milieu une petite quantité du sucre qui se trouve surtout 

 modifié par le microbe. Comme il est des espèces qui font fermenter 

 certains sucres et pas d'autres, on peut trouver là de précieux élé- 

 ments de différenciation. 



Ces cultures en milieux colorés sont surtout employées pour l'iden- 

 tification et la différenciation du Bacille typhique, du Colibacille, des 

 Bacilles dysentériques, du Méningoçoque. Des détails complémentaires 

 seront donnés lors de l'étude de ces espèces. 



5. ENSEMENCEMENT DES CULTURES ET ISOLEMENT DES ESPÈCES 



Prenons, pour commencer, le cas le plus simple, où l'on a affaire à 

 une espèce pure parfaitement isolée, ou à une substance n'en renfer- 

 mant qu'une seule. Les conditions à remplir sont de prendre de cette 

 matière d'inoculation sans y mêler de germes étrangers et de transpor- 

 ter la partie recueillie dans un milieu de culture rigoureusement stéri- 

 lisé, sans introduire en même temps de Bactéries du dehors, qui vien- 

 draient fausser les résultats. Ces trois propositions, pureté de la 

 matière à ensemencer, stérilité absolue du milieu de culture, possibilité 

 d'introduction de germes étrangers dans la manipulation, doivent être 

 continuellement présentes à l'esprit de l'observateur, qui s'efforcera 

 toujours d'éviter, dans la mesure du possible, des causes d'erreurs aussi 

 explicables. 



Pour puiser de la matière à inoculer, on se sert avantageusement 

 d'une aiguille en fil de platine, que l'on confectionne en fixant un fil 

 assez fort, de 5 à (3 centimètres de longueur, dans une tige de bois ou 

 dans une baguette de verre rougie au feu (fig. 156). L'extrémité peut 

 être droite, recourbée en crochet ou en anse (ose) simple ou double. Cette 

 dernière disposition est commode pour prendre des liquides dont on veut 

 une certaine quantité. A recommander de ne jamais omettre de stériliser 

 l'aiguille, en la faisant rougir dans la flamme, avant et après chaque 

 opération; on la laisse refroidir quelques secondes avant de s'en servir. 

 On doit avoir de ces fils de différentes grosseurs pour les diverses opé- 

 rations où on les emploie; les fils fins, se refroidissant vite, doivent ser- 

 vir pour les ensemencements; ils ne doivent cependant pas être assez 

 fins pour plier lorsqu'on les enfonce dans un milieu solide comme les 

 gelées habituelles. De gros fils aplatis en spatule à l'extrémité sont sou- 

 vent fort utiles. L'aiguille de platine peut être remplacée par toute 

 aiguille de métal pouvant être chauffée au rouge; cependant, les autres 

 métaux, traités de cette façon, s'altèrent trop vite. On peut aussi 

 employer des baguettes de verre de petit diamètre, étirées à leur extré- 

 mité. 



Lorsqu'il s'agit de liquides dont on veut recueillir une certaine quan- 

 tité, ou, à plus forte raison, qu'on doit transporter, il faut les récolter 

 à l'aide de pipettes de verre soigneusement stérilisées. On peut prendre 

 de toutes petites pipettes du commerce, de un demi ou de un centimètre 

 cube; il est plus facile d'en fabriquer soi-même (fig. 160, p. 318), qui 

 répondent bien mieux au besoin, en étirant à la flamme des tubes de 

 verre de petit diamètre. On leur donne la longueur nécessaire, on en 

 ferme à la flamme l'extrémité effilée et l'on bouche l'autre avec un tam- 

 pon de coton. On en stérilise un certain nombre en provision, en les 



