320 TECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



très répandues clans la nature et en particulier abondantes sur les herbes 

 lèches, résistent longtemps à une chaleur de 100°, qui tue au contraire 

 la plupart des espèces qui les accompagnent. En faisant bouillir pendant 

 une demi-heure ou trois quarts d'heure une macération de foin, 

 elles gardent seules toute leur vitalité et germent lors du refroidissement, 

 tandis que les autres sont mortes. L'ébullilion est en général un moyen 

 excellent et très pratique pour isoler les espèces qui forment des spores 

 de celles qui n'en produisent pas, ces corps reproducteurs résistant par- 

 fois à une température de 100° et plus. 



On peut encore mettre en œuvre, pour isoler une espèce, la méthode 

 dite de culture élective de Winogradsky (1). Pour ce savant, une 

 culture est élective quand elle ne présente de conditions favorables qu'à 

 la manifestation d'une seule fonction déterminée ou, plus exactement, 

 d'une fonction aussi étroitement limitée que possible. Plus ces conditions 

 seront étroites, exclusives en quelque sorte, plus l'espèce qui est douée 

 de cette fonction sera favorisée aux dépens des autres qui auront la vie 

 moins facile, pénible ou même impossible; le microbe spécifique domi- 

 nera. Il faut donc, pour arrivera l'isoler ainsi : 1° trouver un ensemble de 

 conditions de culture appropriées; ce sera la nature des fonctions 

 connues ou supposées du microbe qui guidera dans la constitution et 

 la disposition du milieu ; 2° bien saisir les caractères morphologiques 

 du microbe prédominant pour ne pas les perdre de vue jusqu'à ce qu'on 

 ait réussi à l'isoler et à l'obtenir en culture pure. 



L'addition de substances antiseptiques peut donner de bons résultats. 

 Les diverses espèces sont en effet loin de réagir d'une façon identique ; 

 une dose, mortelle pour lune d'elles, laisse encore le développement 

 d'autres s'effectuer. La présence d'un peu d'acide phénique dans la géla- 

 tine, conseillée par Chantemesse et Widal, permet d'isoler plus facile- 

 ment le Bacille tijphique et le Colibacille des eaux contaminées, en 

 empêchant le développement des colonies liquéfiantes qui détruisent trop 

 souvent les cultures. 



Cependant, la véritable méthode d'isolement des espèces est celle des 

 cultures sur plaques, qui a été décrite précédemment avec détails 

 (p. 281). La dilution des germes dans la masse de gélatine ou de gélose 

 doit être suffisante pour que les colonies soient bien séparées les unes 

 des autres. De cette façon, après avoir constaté les caractères particu- 

 liers des colonies de l'espèce que l'on veut isoler, au besoin à l'aide de la 

 loupe ou du microscope, on en prélève une faible parcelle à l'aide 

 d'une aiguille stérilisée et l'on ensemence avec elle les milieux que l'on 

 juge convenables au développement de celte espèce. La technique de 

 cette prise de semence a été indiquée précédemment (p. 31 1 ). 



Les Bactéries anaérobies s'isolent par des procédés spéciaux qui ont 

 été décrits en leur place (p. 293). 



Certaines espèces pathogènes se séparent pour ainsi dire toutes seules 

 dans l'organisme animal. Inoculées à des animaux dans un mélange, 

 elles se développent plus rapidement ou plus abondamment que les 

 autres qu'elles étouffent rapidement. L'organisme offre alors tous les 

 caractères d'une culture pure; il peut fournir de la semence absolu- 



(1) Winogradsky, Recherches sur l'assimilation de l'azote libre de l'atmosphère par 

 les microbes ' Arch. des se. hiol. de VInsl. imp. de mèd. de Saint-Pélershourg, III, 

 1834, n<> i). 



