ENSEMENCEMENT DES CULTURES. 32 1 



nient pure pour les cultures. C'est ce qui s'observe pour le Bacillus 

 septicus, le Bacillus anthracis, le Bacillus tuberculosis, le Pneumocoque 

 entre autres. 



Il est du reste un moyen très sûr et très pratique de s'assurer de la 

 pureté d'une culture, moyen qui ne doit jamais être négligé, quand on 

 peut l'employer, c'est la culture sur plaques. On arrive rapidement, en 

 y procédant, à contrôler les expériences et à isoler l'espèce voulue, si 

 d'autres s'y étaient accidentellement mélangées. 



La contamination, assez fréquente encore dans les cultures les mieux 

 conduites, provient de causes diverses qu'il est important de connaître 

 pour pouvoir plus facilement les combattre. Les germes étrangers 

 peuvent venir de l'air, du vase de culture, du milieu de culture, et delà 

 substance d'inoculation. 



L'air tient en suspension beaucoup de Bactéries, dont le nombre varie 

 dans des proportions et suivant des causes que nous étudierons plus 

 loin. Il peut s'en introduire quelques-unes pendant le cours des manipu- 

 lations, en particulier dans le vase de culture, lorsqu'on l'ouvre pour 

 l'ensemencer. Cette cause de contamination est loin d'avoir en réalité 

 l'importance qu'on est porté à lui attribuer. Pasteur (1) avait déjà montré 

 que l'air calme est peu riche en Bactéries ; Miquel (2) a établi, par des 

 expériences précises, des moyennes très concluantes. D'après les 

 recherches de ce savant observateur, la contamination des ballons de 

 culture au bouillon de bœuf, ouverts le temps nécessaire pour l'inocu- 

 lation, serait de 1 p. 200 à la caserne Lobau, en pleine agglomération, 

 de 1 p. 500 à l'observatoire de Montsouris, et seulement de 1 p. 2 500 en 

 plein air au parc Montsouris. De plus, Pasteur a depuis longtemps 

 prouvé que, dans un air relativement calme, les Bactéries en suspension 

 tombaient suivant la verticale et n'avaient jamais de tendance à remon- 

 ter ; si bien que des ballons de bouillon stérilisé, mis en contact direct 

 avec l'air au moyen d'un tube latéral recourbé vers le bas, peuvent se 

 conserver indéfiniment sans présenter de développement de Bactéries 

 dans leur intérieur. Ces résultats ont été confirmés par Hesse (3) dans une 

 nombreuse série d'expériences instituées de la façon suivante: quatre 

 tubes renfermant de la gélatine nutritive sont ainsi disposés et ouverts: 

 le premier a son orifice tourné vers le haut, le second l'a dirigé vers le 

 bas, un troisième est placé horizontalement et le quatrième obliquement 

 l'orifice en haut. Sur ces quatre tubes laissés dans leur position un 

 temps assez long, un seul est contaminé, le premier, celui qui a son 

 orifice dirigé en haut. Lors donc que la chose est possible, dans les 

 cultures sur milieux solides surtout, on devra, avant d'ouvrir un vase 

 de culture, diriger son orifice vers le bas, ou même le tenir complè- 

 tement renversé tout le temps nécessaire à l'opération qu'on exécute 

 et le refermer dans celte position. Il faut en outre n'opérer que loin des 

 courants d'air, dans un endroit où l'air est le moins possible chargé de 

 poussières. On trouvera enfin grand avantage à empêcher la dissémi- 

 nation, dans le local occupé, des germes divers, Bactéries ou Moisissures, 



(1) Pasteur, Examen de la doctrine des générations spontanées [Ann. des se. nal , 

 ZooL, 1861). 



(2) Miquel, Annuaire de l'Observ. de Montsouris, 1S87. 



(3) Hesse, Ueber quantitative Bestimmung der in Luit enthaltenen Microorganismen 

 (Mitth. a us dem kaiserl. Gesundheitsamte, II, 188 i, p. 187). 



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