322 FECHNIQUE BACTÉRIOLOGIQUE. 



provenant des cultures abandonnées, qu'on doit détruire avec soin 

 par la chaleur ou les antiseptiques: c'est une petite précaution qui rend 

 de très grands services. 



Les vases, s'ils sont passés dans le stérilisateur à air chaud, comme 

 nous l'avons indiqué, peuvent être considérés comme absolument 

 purifiés. Il arrive trop souvent que des Moisissures de l'extérieur enva- 

 hissent des cultures en végétant au travers des tampons d'ouate, ce qui 

 survient surtout lorsqu'on coitïe les tubes de capuchons de caoutchouc. 

 11 est alors prudent de faire tremper ces capuchons dans la solution de 

 sublimé à 1 p. 1000 pendant quelques heures. On doit du reste vérifier 

 de temps en temps l'état des bourres d'ouate et, dès qu'on y aperçoit 

 des filaments mycéliens ou, à plus forte raison, des organes reproduc- 

 teurs de Moisissures, chauffer jusqu'au roussi du coton la portion supé- 

 rieure du tube, de manière à tuer ces ennemis des cultures. Quand, 

 malgré toutes précautions, il s'en développe dans la culture, on peut 

 encore quelquefois s'en débarrasser en chauffant à la flamme d'un bec 

 de Bunsen la partie du vase où elles setrouvent, ou en essayant de détruire 

 les îlots qu'elles forment avec une baguette de verre ou une tige de 

 métal rougie au feu. Il est nécessaire, pour les éviter, de s'astreindre 

 à flamber la bourre chaque fois qu'on l'enlève pour examiner la culture. 



La pureté des milieux de culture est obtenue à l'aide des procédés 

 de stérilisation décrits précédemment. Il est toujours bon de faire subir 

 aux vases tout préparés une sorte d'épreuve préalable en les laissant, 

 après leur stérilisation, à la température de l'étuve pendant quel- 

 ques jours avant de les employer. Passé ce temps, s'il ne se produit 

 aucun changement, ils peuvent être considérés comme bons, bien 

 que certaines espèces semblent demander une plus longue prépara- 

 tion, un mois et plus d'après Miquel (1), pour commencer à croître, 

 mais c'est l'exception. Certains liquides nutritifs cependant peuvent 

 ne présenter aucun signe de putréfaction, bien que contenant des 

 germes vivants et aptes à se développer. Cette stérilisalion apparente 

 provient de la non-appropriation du milieu à l'espèce, et s'observe lors- 

 qu'on fait usage de milieux peu appropriés, les liqueurs minérales par 

 exemple. En ajoutant en effet à des cultures de ces liquides, très claires 

 et ne paraissant contenir aucun germe, une faible portion de bouillon 

 de bœuf sûrement stérilisé, on peut voir le mélange se troubler rapide- 

 ment, alors que les deux liquides, conservés séparément, seraient restés 

 indéfiniment stériles. 



Pour obtenir une culture pure, il faut enfin l'ensemencer à l'aide de 

 substance qui ne contient que l'espèce voulue. Nous connaissons les 

 conditions nécessaires pour obtenir ce résultat. 11 peut cependant arriver 

 qu'on obtienne des cultures pures tout en inoculant plusieurs espèces; 

 c'est quand l'une d'elles prend un développement tout à fait prédomi- 

 nant et fait disparaître ses voisines en les étouffant ou en rendant le milieu 

 impropre à leur vie. 



6 DÉVELOPPEMENT DES CULTURES ET MODIFICATIONS DES MILIEUX 



La rapidité du développement, dans des conditions semblables de 

 ehaleur et d'aération, correspond toujours à la qualité nutritive du 



') Miquel, Les organismes vivants de l'atmosphère. Thèse de Paris, 1882, p. 146. 



