364 PRÉPARATIONS ET ÉTUDE MICROSCOPIQUES. 



Procédé à l'encre de Chine. — On mélange soigneusement sur la 

 lame une gouttelette du liquide à examiner, liquide de culture, 

 humeur, avec une goutte d'encre de Chine, et on laisse sécher. 

 On examine à l'immersion à l'huile. Les Bactéries apparaissent 

 brillantes sur fond noir 1 . 



L'emploi de solutions colorantes peu concentrées et inertes donne 

 de très bons résultats. La plupart des espèces vivent très bien toute une 

 journée dans les solutions faibles de fuchsine ou de violet de gentiane. 

 dépourvues des moindres traces d'alcool. Une solution aqueuse assez 

 forte de vert de méthyle est à recommander pour ces examens extempo- 

 ranés; elle aide à distinguer d'intéressants détails de la masse protoplas- 

 mique dont certaines portions sont bien plus avides que les autres de 

 cette matière colorante, si prisée en histologie pour l'étude des forma- 

 tions nucléaires. 



Le rouge neutre Neutralrotli) est un de ces colorants vitaux qui 

 paraît donner les meilleurs résultats. Ehrlich (2) a signalé le premier 

 sa propriété de colorer des éléments vivants dont certaines parties le 

 fixent énergiquement. Plato et Himmel (3) ont signalé des particulari- 

 tés intéressantes de cette coloration spéciale qui paraît être due à la 

 sécrétion de produits destinés à la défense cellulaire et ne se manifes- 

 tant que pendant la vie de l'élément. Pour l'employer, on chauffe dans 

 de l'eau distillée du rouge neutre en excès et on laisse refroidir; 1 cen- 

 timètre cube de cette solution saturée est mélangé à 100 centimètres 

 cubes de solution physiologique. 



Pour les espèces qui ne végètent bien qu'à une température assez 

 élevée, l'usage des platines chauffantes devient très utile. On peut faci- 

 lement laisser la préparation à demeure dans la platine qui est placée 

 sur le microscope chaque fois qu'il est nécessaire. Dans les intervalles, 

 elle se pose sur un support de même hauteur que la platine du micro- 

 scope. Ces mêmes appareils servent aussi à étudier l'action des hautes 

 températures sur les Bactéries. Laplatine chauffante de Ranvier et la 

 chambre chaude de Yignal (p. 219) répondent à tous les besoins. 



EXAMEN A L'AIDE DE RÉACTIFS 



Les préparations, faites comme il vient d'être dit, sont loin de 

 suffire à toutes les exigences. La transparence des Bactéries est souvent 

 si grande qu'il est difficile, parfois même impossible, de les distinguer; 

 leur réfringence peu considérable se confond presque avec celle du 

 liquide; employé.' Les contours sont alors d'autant moins nets que l'indice 

 de réfraction du liquide est élevé; assez visibles dans des liquides aqueux, 

 ils deviennent difficiles ;'i suivre dans des liquides visqueux plus ré- 

 fringents, le sang, les liquides albumineux, les solutions sucrées con- 

 centrées, par exemple. Si, de plus, les Bactéries sont rares dans la 



I i I'.ihhi, Das Tuscheverfahren als ein fâcher Miltel zur Lôsung einiger schwieriger 

 Aufgaben der Bakterioscopie. léna, Fischer, 1909. 



(2} Ehrlich, Ueber Neutralrolh [Allgem. mcd. Cenlralzeiluny . 1894, n° 2). 



(3) Plato et Himmel, Le rouge neutre (Neatralroth) (Ann. de l'Inst. Pasteur, XVJ 

 1902, p. 663). 



