FIXATION DES PRÉPARATIONS. 369 



mais seulement dans les cas où le liquide est peu riche en matières 

 graisseuses et albuminoïdes. Une goutte d'une solution d'acide osmique 

 à 1 ou 2 p. 100 sera mélangée sur la lamelle à une goutte du liquide à 

 examiner, ou, mieux, une goutte de ce liquide sera évaporée sur 

 la lamelle, puis le résidu soumis à l'action d'une solution osmiquée. 

 L'acide osmique en vapeurs donne aussi de très bons résultats ; Fis- 

 cher (1) le recommande concurremment avec l'emploi d'iode en solution 

 alcoolique. L'acide osmique se vend en tubes scellés de 1 gramme ou 

 de un dixième de gramme. Il faut préserver ses solutions de la lumière 

 et plus encore éviter soigneusement les poussières. Le mieux est de con- 

 server l'acide osmique en flacons à l'émeri sous forme d'une solution 

 à "2 p. 100 dans la solution d'acide chromique à 1 p. 100, selon le conseil 

 de BollesLee etHenneguy. La même solution servira pour la fixation au 

 moyen des vapeurs et aussi pour faire la liqueur de Flemming. Il est 

 également nécessaire de se souvenir que les vapeurs sont irritantes 

 et parfois provoquent des conjonctivites. 



L'acide chromique et leschromates alcalins, si employés autrefois, pré- 

 sentent tant d'inconvénients qu'ils ne doivent plus servir à fixer qu'ex- 

 ceptionnellement, On donne maintenant la préférence à l'un ou l'autre 

 des deux fixateurs suivants. 



Le mélange chromo-acéto-osmique de Flemming (mélange fort) est 

 très à recommander comme fixateur des tissus, d'autant plus qu'il n'em- 

 pêche pas la coloration subséquente des Bactéries. Il se prépare ainsi, 

 d'après Bolles Lee et Henneguy : on fait et l'on conserve à part : à) une 

 solution contenant : acide chromique à 1 p. 100, 11 parties ; eau, 

 4 parties; acide acétique, 1 partie, et b) une solution d'acide osmique 

 à 2 p. 100 dans l'acide chromique à 1 p. 100. Pour faire le liquide 

 définitif, on mêle 4 parties de a avec une partie de b ; il est préférable de ne 

 faire le mélange qu'au moment du besoin. On fixe de très petits frag- 

 ments par une immersion de une heure à vingt-quatre heures de durée, 

 on lave ensuite à l'eau courante pendant le même temps, puis succes- 

 sivement aux alcools à 70°, 80°, 90°. Après cette fixation, les diverses 

 méthodes de colorations à la safranine O (Wasserlôslich) sont les plus 

 recommandables. 



Leswè/fWensolutionaqueuse saturée est également un fixateur de pre- 

 mier ordre, pourvu qu'on ne le laisse agir que le temps voulu et qu'on 

 l'éloigné ensuite rapidement et complètement par des lavages successifs 

 dans les alcools à 70", 80°, 90°, auxquelson ajoute de la teinture d'iodejus- 

 qu'à ce que les objets ne décoloren t plus le mélange. On fixe avec le sublimé 

 des fragments dont le diamètre ne dépasse pas un tiers de centimètre, en 

 une demi-heure à vingt-quatre heures. Le meilleur mode de préparation 

 est de dissoudre en chauffant 75 grammes de sublimé dans 1000 grammes 

 d'eau. Quand le fond du vase refroidi se tapisse d'aiguilles cristallines 

 blanches, le liquide peut seulement être considéré comme saturé. La 

 solution dans l'eau, à 3 p. 100, donne également de très bons résultats; 

 les lamelles préparées sont soumises à son action pendant vingt à trente 



(1) Fischer, Untersuchungen iiber Bakterien [Jàhro. fur wiss. Bot., XXVII, 1894). 

 Macé. — Bactériologie, 6e édit. 24 



