370 PRÉPARATIONS ET ETUDE MICROSCOPIQUES. 



minutes, puis lavées à très grande eau ou comme il vient d être indiqué. 

 Schaudinn \anie\e sublimé alcoolique (solution aqueuse saturée de su- 

 blimé, 2 parties; alcool absolu, 1 partie). Laisser la lamelle de douze à 

 vingt-quatre heures; elle doit d'abord flotter, la face enduite en dessous; 

 plus tard, on peut l'immerger. 



L'alcool absolu durcit bien, mais conserve mal les structures. Il a 

 cependant l'avantage, sur les deux méthodes précédentes, de la rapidité 

 et de la facilité. Kûhne en conseille l'usage pour fixer les tissus qu'on doit 

 couper au microtome à congélation. Koch s'en est surtout servi pour 

 fixer des liquides. Les lamelles munies de la couche mince obtenue par 

 évapora tion du liquide sont placées dans un bain d'alcool absolu pendant 

 un temps variable (deux ou trois jours) jusqu'à coagulation parfaite et 

 adhérence complète au verre. C'est l'appréciation de ce temps quiestle 

 point le plus délicat de cette méthode. Il faut soumettre en même temps 

 au réactif plusieurs préparations pour apprécier ainsi, par tâtonnements, 

 l'état de la pellicule. Après ce procédé de fixation, on obtient de belles 

 colorations, surtout au point de vue de leur uniformité. 



On peut employer de la même façon un mélange à parties égales 

 d'alcool absolu et d' et fier ou d'alcool absolu additionné, suivant le cas, 

 d'un sixième ou d'un tiers d'acétone, préférable suivant Nicolle (1). 



Comme conclusions, pour les liquides, employer couramment la fixa- 

 tion par le chauffage dans la flamme bleue d'un bec de Bunsen, puis 

 encore l'alcool-éther qui déformera moins ; pour les tissus, employer, 

 comme méthode rapide, la fixation à l'alcool et, comme méthode déli- 

 cate de recherches, la fixation soit au liquide de Flemming, soit au 

 sublimé, suivant les cas, et l'expérience personnelle aussi. 



II. — Coloration des préparations. 



RÉACTIFS COLORANTS 



Les Bactéries, déjà si pâles dans l'eau ou les liquides peu denses, se 

 distinguent moins bien encore dans les milieux employés à la confection 

 des préparations, dont la réfringence est égale à celle de leur corps cel- 

 lulaire ou s'en approche. Sur de telles préparations, les contours 

 paraissent parfois si peu nets, même à l'aide de forts objectifs, qu'il devient 

 dilficile de se rendre un compte exact des formes et des dimensions 

 réelles de ces objets; le dessin en est difficile et la photographie souvent 

 impossible. L'usage de substances colorantes a considérablement facilité 

 ces recherches ; aussi a-t-on à signaler de grands progrès dans l'étude 

 de ces êtres inférieurs depuis l'emploi judicieux des méthodes de colo- 

 ration. 



1" COLORATION PAR L'IODE 

 L'iode, qui teint si facilement en jaune les différentes parties de la 



(li Nicolle, Pratique des colorations microbiennes (Ann. de l'Inst. Pasteur, VIII, 

 1895, p. 66 51. 



